TRÁFICO NO CONVENCIONAL Y DISPOSICIÓN DE PROTEÍNAS DE MEMBRANA EN TRYPANOSOMA CRUZI

CARLEVARO G; LANTOS A; BURGOS J; CAMPETELLA O; MUCCI J

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Encuentro; Sociedad Argentina de Protozoología XXVII Reunión Anual; 2015

Sociedad Argentina de Protozoología

A diferencia de los mamíferos, la membrana plasmática de los tripanosomátidos posee un alto porcentaje de proteínas ancladas por glicosil-fosfatidil-inositol (GPI). En T. cruzi, hemos demostrado que tres proteínas ancladas por GPI (TS, TSSA y mucinas) alcanzan la membrana plasmática a través de un transporte no convencional que involucra a la vacuola contráctil (VC), una organela ausente en mamíferos, involucrada en la osmo-regulación en protozoarios. Para estudiar si constituye una vía de tránsito general de proteínas hacia la superficie del parásito, analizamos el transporte de tres proteínas con distinto ancla a membrana [Calpaína (miristoilada y palmitoilada), KMP (sin señal aparente) y TolT (GPI)], todas dispuestas en dominios lipid raft de la membrana flagelar de tripomastigotes. Dichas proteínas fueron clonadas y expresadas para generar anticuerpos específicos. Por inmunofluorescencia, solamente la TolT pudo ser observada en la VC durante su transporte hacia la membrana plasmática, indicando que la VC no forma parte de una vía de tránsito general, sino que estaría involucrada en el transporte de proteínas ancladas por GPI. Posteriormente analizamos la disposición de las tres proteínas en la membrana. Todas se observaron en dominios discretos, de tamaños variables según la proteína, en la membrana que recubre el flagelo de tripomastigotes. Como se esperaba, ninguna proteína en estudio colocalizó con la TS (presente en dominios no lipid-rafts-like). Sin embargo, tampoco fueron observadas en los dominios lipid rafts marcados por las Mucinas. Estos últimos resultados indican que la membrana del parásito estaría formada por múltiples dominios estables, más allá de la distinción entre los tipos de dominios lipídicos.