Identificación de Inhibidores de la trans-Sialidasa de Trypanosoma cruzi por Screening Virtual basado en Similitud del Sustrato.

FERREYRA J; GALLO FN; CAMPETELLA O; BOLLINI M; MUCCI J

Congreso; Xi Congreso de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

El parásito protozoario Trypanosoma cruzi es el agente etiológico de la enfermedad de Chagas, enfermedad endémica en más de 21 países del mundo. Se estima que entre 8 y 10 millones de personas se encuentran infectadas y alrededor de 100 millones corren riesgo de contraer la enfermedad. Hasta el momento sólo existen dos drogas aceptadas para el tratamiento de la enfermedad, el nifurtinox y Beznidazol, las cuales son poco efectivas en la etapa crónica de la infección.La trans-sialidasa (TS) de T. cruzi es una enzima capaz de trasferir ácido siálico desde los glicoconjugados del hospedador hacia moléculas tipo mucinas en la superficie del parásito siendo crítica para evadir el sistema inmune, la infección celular y está ausente en mamíferos. Por ende, la TS resulta ser un blanco atractivo para el desarrollo de nuevos fármacos. Cabe destacar que no existen buenos inhibidores contra la TS y sólo unos pocos se encuentran en el rango de IC50 ≈1-10 μM. Partimos de una base de 3000 compuestos con similitud fisicoquímica con la sialil-lactosa, sustrato de la TS, obtenidos utilizando el software PharmaScreem de la compañía PharmaCelera. Luego para refinar la búsqueda, se llevó a cabo un screening virtual de 3000 compuestos en el sitio activo de la enzima TS (PDB: 1s0i), usando 4 programas de docking: AutoDock vina, AutoDock 4, Smina y LeDock. Las moléculas mejor posicionadas fueron agrupadas según similitud estructural, y de cada grupo se seleccionó una molécula ponderando aquellas que presentan interacciones claves en el sitio activo según los resultados de docking, y aquellas con adecuados perfiles farmacológicos. Se estudió el comportamiento de cada una de estas moléculas en el sitio activo en dinámicas moleculares de 500 ns de duración y con toda esta información se seleccionaron y adquirieron 24 compuestos. Estos fueron evaluados enzimáticamente a 3 concentraciones fijas 1 mM, 0,1 mM y 0,01 mM y tres compuestos resultaron ser activos a 10 μM mostrando IC50 entre 3-9 μM.