Caracterización funcional del ácido siálico presente en las glicoproteínas de superficie de T. cruzi en la infección del hospedador invertebrado

CÁMARA MD L; PRATO A.; PARADA-PUIG R; TRIBULATTI MV; MUCCI J

Congreso; XI Congreso Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Trypanosoma cruzi presenta un ciclo de vida complejo alternando entre un hospedador invertebrado y un hospedador mamífero. La infección del hospedador invertebrado se encuentra aún poco caracterizada. Trabajos previos sugieren que las glicoproteínas de superficie jugarían un rol clave en la adhesión del epimastigote al epitelio del tracto digestivo del insecto, muchas de las cuales son aceptoras de ácido siálico. Por consiguiente, nos propusimos estudiar el efecto del siálico en la adhesión del parásito al epitelio del recto de T. infestans. Mediante ensayos de adhesión in vitro sobre ampollas rectales de ninfas de 4 estadio de T. infestans y epimastigotes de las cepas CL Brener y Dm28c sialidados o no; pudimos determinar que la sialidación de las moléculas de superficie disminuye la adhesión de los parásitos al recto del insecto. Este resultado indicaría que la adición de siálico es la responsable del despegado de los parásitos de la ampolla rectal, proceso clave para su diferenciación y Pósterior transmisión al hospedador mamífero. Luego nos focalizamos en encontrar el posible receptor de las glicoproteínas del epimastigote en el tracto digestivo del insecto. A partir de extractos proteicos de intestino y recto de ninfas de 4 estadio de T. infestans realizamos una purificación utilizando una columna de lactosil-sefarosa, que une proteínas con afinidad por lactosa. El eluido específico (200mM Lactosa) fue analizado por SDS-PAGE teñido por Coomassie coloidal y las bandas detectadas fueron analizadas por espectrometría de masa. Pudimos identificar dos lectinas, una de unión a galactosa y otra de unión a ramnosa que podrían ser los posibles ligandos de las glicoproteínas de la superficie del parásito. Estamos en proceso de clonarlas y caracterizarlas. Esperamos que los resultados obtenidos permitan comprender con mayor detalle la biología de T. cruzi y pueda ser capitalizado para el desarrollo de nuevas herramientas contra la Enfermedad de Chagas.