Efectos del Calcitriol y DL-Butionina-S,R-Sulfoximina sobre la proliferación de células intestinales neoplásicas.

LIAUDAT C.; BOHL L; TOLOSA DE TALAMONI NG; PICOTTO G

Córdoba

Jornada; 1ras Jornadas Latinoamericanas Sociedades de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba; 2008

Sociedad de endocrinología y metabolismo de Córdoba, Ateneo Regional Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología (FASEN)

1,25(OH)2D3 Y DL-BUTIONINA-S,R-SULFOXIMINA ESTIMULAN LA APOPTOSIS DE CÉLULAS DE CÁNCER DE MAMABohl Luciana1, Liaudat Cecilia1, Marchionatti Ana1, Picotto Gabriela1, Rodriguez Valeria1, Narváez Carmen2, Welsh JoEllen2, Tolosa de Talamoni Nori11Laboratorio ?Dr. Cañas?, Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba, Argentina. 2Department of Biological Sciences, University of Notre Dame, Notre Dame, Indiana, USA La apoptosis es un proceso fisiológico, activo y programado. Una resistencia anormal a la apoptosis puede provocar neoplasias u otras enfermedades. El 1,25(OH)2D3 (calcitriol) induce apoptosis en células tumorales de mama por disrupción de la función mitocondrial asociada con la translocación de Bax a la mitocondria, liberación de citocromo c y producción de especies reactivas del oxígeno (ROS). Por otra parte, se conoce que los compuestos que disminuyen los niveles de glutatión (GSH) intracelular pueden potenciar la acción de las drogas antitumorales en ciertos tipos de cáncer. Se sabe que DL-butionina-S,R-sulfoximina (BSO) produce disminución de la síntesis de GSH, inhibiendo a la enzima -glutamil-cisteína sintetasa. El objetivo de nuestro trabajo fue estudiar los efectos sobre la apoptosis desencadenados por calcitriol y/o drogas que disminuyen GSH intracelular (BSO) en líneas celulares de cáncer de mama, estrógeno-dependientes, sensibles (MCF-7) y resistentes a vitamina D (MCF-7DR). Para ello, se emplearon células MCF-7 y MCF-7DR las cuales se cultivaron en DMEM (5% FBS) y se trataron con calcitriol (100 nM), BSO (20 M), calcitriol + BSO o vehículo (etanol < 0.1%) durante 96 horas. La proliferación celular se determinó por la técnica de violeta de cristal. La apoptosis se evaluó por la fragmentación del ADN (técnica de TUNEL) y mediante la determinación de la localización del citocromo c (inmunohistoquímica). La producción de ROS se determinó por citometría de flujo y los niveles de GSH, por espectrofotometría. Los resultados fueron evaluados estadísticamente mediante ANOVA a una vía, seguido del test de Bonferroni como test post-hoc. Las diferencias entre grupos se consideraron significativas a p