CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA Y BIOLÓGICA DE OVARIOS Y OVOCITOS BOVINOS PARA ESTABLECER CRITERIOS DE SELECCIÓN PARA ENSAYOS DE IVM

OPIZZO B; LIAUDAT ANA CECILIA; BLOIS D; GONZALEZ MARINA; BOSCH, PABLO

Congreso; XXV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2022

CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA Y BIOLÓGICA DE OVARIOS Y OVOCITOS BOVINOS PARA ESTABLECER CRITERIOS DE SELECCIÓN PARA ENSAYOS DE IVMOpizzo BA(1), Liaudat AC(1), Blois D(1), González MA(1), Bosch P(1)INBIAS-CONICET/Dpto. de Biología Molecular-Universidad Nacional de Río Cuarto (1); biancaopizzo@gmail.comEn la producción in vitro de embriones (IVP), generalmente se emplean ovocitos provenientes de ovarios de animales de mataderos. Esto hace que su calidad sea muy variable ya que la categoría y condición de las hembras faenadas normalmente se desconoce. Por lo tanto, invariablemente se obtiene una población heterogénea de ovocitos con capacidad diferente para madurar y soportar el desarrollo embrionario. El objetivo de este trabajo fue estudiar las características morfológicas y biológicas de ovarios y ovocitos provenientes de bovinos faenados para establecer criterios de selección ovocitaria para su posterior uso en la IVP. Para ello, se clasificaron los ovarios según presencia/ausencia de estructuras, tales como cuerpo lúteo (CL), folículo dominante FD, ambas (CL+FD), o ninguna (NO) y se determinó el número y diámetro de los folículos los cuales fueron agrupados en tres categorías: 8 mm. Sobre los complejos cúmulus-ovocitos (COCs) obtenidos por aspiración folicular se determinó: cobertura del ovocito por las CC, capas de células del cúmulus (CC), compactación, espesor de las capas de CC; en ovocitos denudados se determinó: área, perímetro y diámetro del ooplasma y espesor de la zona pelúcida (ZP). Además, los ovocitos fueron teñidos con Hoechst 33342, Ioduro de propidio o Rodamina 123 para analizar morfología nuclear y metafase, viabilidad celular y funcionalidad mitocondrial, respectivamente. Todas estas determinaciones se efectuaron sobre microfotografías capturadas con una cámara acoplada a un microscopio invertido y procesadas por el software Fiji. Por último, se procedió con la maduración in vitro (IVM) de los COCs utilizando metodologías convencionales. Luego de la IVM se repitieron las mediciones realizadas en COCs inmaduros. El análisis estadístico se llevó a cabo mediante ANOVA y Test de Bonferroni utilizando el software InfoStat. Los resultados arrojaron un predominio ovarios con CL+FD y respecto al tamaño folicular hubo más frecuencia de folículos en la categoría