EFECTOS DEL 1.25(OH)2D3 SOBRE LA CAPACITACIÓN, ESTADO REDOX Y MUERTE CELULAR DE ESPERMATOZOIDES BOVINOS CRIOPRESERVADOS

GONZALEZ MARINA; EBEL BARRERA F; OPIZZO B; BLOIS D; BOSCH, PABLO; RODRIGUEZ, NANCY; LIAUDAT ANA CECILIA

Congreso; XXV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2022

EFECTOS DEL 1.25(OH)2D3 SOBRE LA CAPACITACIÓN, ESTADO REDOX Y MUERTE CELULAR DE ESPERMATOZOIDES BOVINOS CRIOPRESERVADOSGonzalez MA, Ebel F, Opizzo B, Blois D, Bosch P, Rodríguez N, Liaudat AC.Instituto de Biotecnología Ambiental y Salud (INBIAS), Universidad Nacional de Río Cuarto (UNRC)-Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET). E-mail: aliaudat@exa.unrc.edu.arEl metabolito activo de la vitamina D, el 1.25(OH)2D3 o calcitriol, se asocia positivamente con la activación de vías moleculares involucradas en la motilidad de los espermatozoides, la capacitación y la reacción del acrosoma. La capacitación espermática es un proceso que ocurre naturalmente en el tracto reproductor de la hembra y consiste en una serie de cambios moleculares que un espermatozoide debe atravesar para poder fecundar el ovocito. El objetivo de nuestro trabajo fue estudiar el efecto in vitro del agregado de calcitriol al medio de manipulación sobre el proceso de capacitación espermática, estado redox y muerte celular de espermatozoides bovinos criopreservados. Un millón de espermatozoides bovinos descongelados provenientes de pajuelas de diferentes animales se trataron con 20 nM de calcitriol durante 30 minutos. Además se incluyó espermatozoides controles (etanol, vehículo del calcitriol) y tratados con heparina (100 µg/ml, control positivo de capacitación). Se estudió la motilidad, el vigor, la integridad de membrana plasmática y acrosómica mediante microscopía de contraste de fases. El porcentaje de capacitación y la morfología nuclear de los espermatozoides tratados se analizó por microscopía de fluorescencia. Además se evaluó la viabilidad, los niveles de especies reactivas del oxígeno (ERO), el potencial de membrana mitocondrial (ɅΨm) y la externalización de la fosfatidil serina (PS) por citometría de flujo. Se incluyó espermatozoides tratados con menadiona 30 µM durante 30 minutos como control positivo de inducción de ERO. Los resultados se analizaron estadísticamente mediante ANOVA a una vía y el test de Bonferroni como test post-hoc. Las diferencias entre grupos se consideraron significativas a p