Potencial aplicacion de Pseudomonas sp. PCI2 para el control de patógenos fúngicos de tomate

PASTOR, N.; CORDERO, P.; ROSAS, S.; ROVERA, M.

Congreso; XII Congreso Argentino de Microbiología; 2010

Antecedentes: Las enfermedades fúngicas son uno de los principales factores que limitan la producción de los cultivos hortícolas. El control biológico ofrece una estrategia para aumentar las prácticas actualmente disponibles para el manejo de las enfermedades vegetales. En años recientes, varios estudios han señalado que las pseudomonas fluorescentes tienen un potencial considerable como agentes de control de patógenos fúngicos, dado que son nutricionalmente versátiles, tienen tasas de crecimiento rápidas, y producen metabolitos antifúngicos. En ensayos previos se aisló una cepa bacteriana (Pseudomonas sp. PCI2) a partir del sistema radical de plantas sanas de tomate. In vitro, PCI2 inhibe a S. rolfsii y A. alternata, presenta actividad quitinolítica y produce sideróforos. En ensayos de inoculación realizados en tomate, incrementó un 29% el porcentaje de plantas paradas, evidencia de la potencial capacidad de control del damping-off de tomate causado por S. rolfsii. Objetivos: (1) caracterizar genotípicamente a Pseudomonas sp. PCI2, (2) detectar genes codificantes de antibióticos en la cepa PCI2, y (3) analizar su efecto sobre el tizón foliar causado por A. alternata. Materiales y Métodos: Caracterización genotípica. MACROGEN Inc. realizó la amplificación y el secuenciamiento del gen 16S rRNA. La secuencia de 780 pb resultante se analizó mediante el algoritmo BLASTN, disponible en el GenBank. La secuencia de la cepa PCI2 se alineó, usando el programa BioEdit V 7.0.9.0, con secuencias obtenidas a partir de la base de datos del Genbank. Adicionalmente, se usó el programa PAUP* V 4.08b para conducir el análisis de las secuencias del gen 16S rRNA. Detección de genes codificantes de antibióticos. Se realizaron ensayos de PCR para detectar los genes phlD, phz, pltC y prnD involucrados en la biosíntesis de 2,4-diacetilfloroglucinol, 1-ácido carboxílico fenazina, pioluteorina y pirrolnitrina, respectivamente, en PCI2. Efecto sobre el tizón foliar por A. alternata. Las partes aéreas de plantas de tomate de 30 días se atomizaron con una suspensión de PCI2 en caldo tripticasa soya (TSB)(7x106 UFC/mL). Las plantas se colocaron en cámara de crecimiento a 28°C. 24 horas después, las hojas se infestaron en ocho sitios diferentes (10 μl por gota) de una suspensión de A. alternata (4,6x104 conidios/mL). Como controles, se usaron plántulas no tratadas y no infestadas con A. alternata, y plántulas tratadas con TSB estéril. Los resultados se registraron mediante el conteo de hojas sanas luego de cuatro días. Resultados y Conclusiones: PCI2 mostró un 100% de identidad con especies de Pseudomonas. Particularmente, PCI2 se agrupó dentro de la especie P. putida. No se amplificó ninguno de los fragmentos de DNA correspondientes a los antibióticos probados. El pre-tratamiento de plántulas de tomate con PCI2 incrementó el porcentaje de hojas sanas en un 10%, La cepa PCI2 representa una alternativa promisoria para el control de patógenos de plantas de tomate, tales como S. rolfsii y A. alternata, en invernaderos comerciales.