ORIGEN DE LAS DEFENSAS POR PERIVITELINAS EN Pomacea

I. PAVÍA; M. Y. PASQUEVICH; H. HERAS

Santa Clara del MAR

Taller; 7mo Taller POMACEA "Biología de Ampullariidae"; 2023

Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata

Los caracoles dulceacuícolas del género Pomacea (Ampullariidae) son gasterópodos nativos deAmérica que depositan huevos calcáreos fuera del agua. Estos huevos, poseen un fluido perivitelino(FPV) cuyas proteínas (perivitelinas) nutren y protegen al embrión. Los linajes ramificados másrecientemente: clado Canaliculata y clado Bridgesii, combinan como defensa antidepredaciónperivitelinas pigmentadas antinutritivas (no digeribles) llamadas PV1, con proteínas inhibidoras deproteasas, lectinas y una toxina, llamada PV2. Sin embargo, la información sobre las defensas enlinajes de ramificación temprana es escasa. Nuestro objetivo es comenzar a comprender laevolución del sistema de defensa del género Pomacea. Para ello, estudiamos las perivitelinas enPomacea sordida, especie endémica de Río de Janeiro, Brasil, perteneciente al clado Flagellata, ellinaje ramificado más tempranamente y lo comparamos con la información existente de los cladosmás derivados. Un estudio preliminar mostró que P. sordida presenta proteínas antinutritivas,inhibidores de proteasas y lectinas. Para profundizar dicha caracterización analizamos la toxicidaddel FPV en murinos mediante inyección intraperitoneal y administración oral. También analizamosla presencia de perivitelinas homologas a las de las especies estudiadas previamente, medianteWestern Blot con anticuerpos anti PV1 de P. canalicuata y P. scalaris, y anti-PV2 de P. canaliculata.Además, se secuenció el transcriptoma de la glándula del albumen (encargada de sintetizar lasperivitelinas), y se analizó la presencia de perivitelinas homólogas a PV1, PV2 e inhibidores deproteasas, mediante herramientas bioinformáticas. El FPV (de 200 µL, 2,64 µg/µL) causó 100% demortalidad a los ratones antes de las 96 horas de ser administrado por vía intraperitoneal y por víaoral alteró la superficie absortiva que disminuye significativamente a las 24 h además de observarsehiperemia, infiltración de macrófagos y linfocitos entre los fibroblastos y edema en el corion de lasvellosidades intestinales. A las 48 h hay una tendencia del intestino a revertir hacia la morfologíanormal. El FPV de P. sordida posee proteínas con reactividad cruzada con anticuerpos anti-PV1 yanti-PV2. Además, se identificaron proteínas homologas a las subunidades de PV1, PV2, einhibidores de proteasas en el transcriptoma de la glándula del albumen. Podemos concluir que loshuevos de P. sordida son letalmente tóxicos para murinos, donde la PV2 podría ser la responsablede la toxicidad. La presencia de PV1, PV2, lectinas e inhibidores de proteasas en una especie deramificación temprana indicaría que la defensas por perivitelinas se habrían originadotempranamente en el género y evolucionaron diferencialmente en cada clado.