Prácticas en Laboratorio Biológico, Aprendizaje en el Diseño de Protocolos de Experimentación-PRIMER PREMIO

ALUMNOS DE LAS PRÁCTICAS DE LAB. ANALISTA BIOLÓGICO: BERARDO MS; GIUDICE N; RODRIGUEZ C; SUAREZ M; PEREYRA V; CACACE E; PERALTA, E; HENRY F; CORNEJO V; FUNES R; OROZCO E; ASORES: VALLCANERAS S; CASAIS M; RASTRILLA AM

Congreso; VII Congreso Nacional de Estudiantes de Farmacia; II Jornadas Científicas y Encuentro de Jóvenes Investigadores; 2010

PRÁCTICAS DE LABORATORIO BIOLÓGICO. APRENDIZAJE EN EL DISEÑO Y DESARROLLO DE PROTOCOLOS DE EXPERIMENTACIÓN. Autores: Berardo MS, Giudice N, Rodriguez C, Suarez M, Pereyra V, Cacace E, Peralta, E, Henry F, Cornejo V, Funes R, Orozco E. Asesores: Vallcaneras S, Casais M, Rastrilla AM. Curso: Prácticas de Laboratorio Biológico. Carrera: Analista Biológico. Laboratorio de Biología de la Reproducción (LABIR). Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia. Universidad Nacional de San Luis. El Curso de Prácticas de Laboratorio Biológico tiene por objetivo que el alumno adquiera destreza en técnicas de Laboratorio Biológico, implemente normas de bioseguridad y aprenda a diseñar y desarrollar un experimento. Para ello se le brindó información básica sobre la rata como modelo de experimentación, normativa sobre cuidado y uso de animales, estado fisiológico de la preñez y regulación hormonal y neural del ovario. A partir de los conceptos adquiridos, se planteó la siguiente hipótesis: en el día 17 de preñez, en la rata, prolactina (PRL) y dopamina (DA) inhiben el metabolismo de progesterona (Pg). Se utilizó una rata de la cepa Holtzman en el día 17 de preñez. Se extrajeron, desde los ovarios, las células luteales y se incubaron 3 x 105 células por well en medio 199 a 37°C durante 4 h en estufa de cultivo (95%O2 y 5% CO2). Los grupos experimentales fueron células estimuladas con prolactina (10-7 M; PRL) y dopamina 810-6 M; DA). Los grupos control, no recibieron tratamiento. Finalizado el tiempo de incubación, se separaron los líquidos de incubación de las células por Ultracentrifugación. Los sobrenadantes se conservaron a -20 °Cpara determinar, por radioinmunoanálisis, la concentración de Pg (ng/ml) y las células luteales a -80 °C para determinar, por espectrofotometría, la actividad enzimática de 3β-hidroxiesteroide deshidrogenasa (3β-HSD) y 20α- hidroxiesteroide deshidrogenasa (20α-HSD) (mUI/mg proteína), enzimas de síntesis y degradación de Pg, respectivamente. Los resultados mostraron que tanto PRL como DA disminuyeron significativamente la liberación de Pg respecto del grupo control (*p<0.01, ?p<0.001). Por su parte, PRL sólo disminuyó la actividad de 3β-HSD (&p<0.05) mientras que DA disminuyó tanto la actividad de 3β-HSD como de 20α-HSD (&p<0.05). Del desarrollo experimental se concluye que PRL y fundamentalmente DA inhiben la liberación de Pg luteal posiblemente por modificación de la actividad de sus enzimas metabólicas. Del desempeño en las prácticas se demuestra que los alumnos adquirieron los principios fundamentales para el desemvolvimiento en el Laboratorio Biológico.