Extractos de frutos autóctonos del NOA inhiben la vía wnt/b-catenina en embriones de Xenopus laevis

GABRIELA C. SOMAINI; MANUEL J. AYBAR; NANCY VERA; CELESTE TRÍBULO

Chascomús, Buenos Aires

Congreso; IV Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2018

Los compuestos naturales de plantas constituyen una fuente de sustancias capaces de regular distintas vías de señalización como la vía wnt/beta-catenina. Esta vía es necesaria para la especificación dorsal durante el desarrollo temprano de Xenopus laevis y su desregulación genera anormalidades en la formación del eje de los embriones. En este trabajo se utilizaron extractos acuosos de frutos de Ziziphus mistol (EAM) y Geoffroea decorticans (EACH). Nuestros estudios previos demostraron que estos extractos son capaces de producir fenotipos ventralizados compatibles con la inhibición de la vía wnt/beta-catenina y revertir el efecto de dorsalización del LiCl, un activador de la vía. Para corroborar el efecto inhibidor de los extractos, se analizó la expresión de chordin (chd), un gen marcador del labio dorsal del blastoporo, luego de la incubación de los embriones con LiCl y con los extractos. Se observó una disminución de la expresión de chd del 71,4 % para EAM y del 44,4 % para EACH. Por otra parte, se procedió a activar la vía utilizando BIO, un compuesto sintético que impide la degradación de beta-catenina. BIO produce fenotipos dorsoanteriorizados en los embriones. Para determinar si EAM y EACH eran capaces de revertir este efecto, los embriones fueron incubados con BIO y con los extractos y los fenotipos observados se clasificaron según el Índice dorsoanterior (DAI). Cuanto mayor es DAI mayor es el grado de dorsoanteriorización. El DAI promedio para los embriones tratados con BIO fue de 7.60 mientras que para los embriones tratados con EAM fue de 6.42 y con EACH, 6.13 lo que demuestra que ambos extractos fueron capaces de revertir el efecto activador de BIO. Finalmente, se procedió a analizar mediante inmunohistoquímica los niveles de beta-catenina en los embriones luego del tratamiento con los extractos y se observó una disminución de beta-catenina del 93,75 % para los embriones tratados con EAM y del 82 % para EACH. Estos resultados muestran que los extractos acuosos de Ziziphus mistol y Geoffroea decorticans son capaces de producir fenotipos moleculares y morfológicos compatibles con la inhibición de la vía wnt/b-catenina y revertir el efecto de activación de esta vía.