Evaluación serológica de pacientes con cura clínica para la infección leishmaniásica, tratados con Glucantime (Sbv)

GIL, JF; PEREYRA, VA; LOPEZ QUIROGA, I.; ACOSTA, N; JUAREZ, M; CAJAL, SP; CIMINO, RO; TARANTO, NJ; NASSER, JR

Salta, Argentina

Jornada; III Jornadas de Comunicaciones Internas y I Jornadas de Enseñanza de las Ciencias Naturales; 2007

Palabras claves: Leishmaniasis, diagnóstico, ELISA (Ensayo inmunoenzimático),  tratamiento, Chagas - Mazza. Objetivos: a) Evaluar  los niveles de anticuerpos (Ac) en pacientes leishmaniásicos  antes y después del tratamiento con Glucantime (Sbv)  y que evidenciaron cura clínica. b) Estudiar la posible variación de los niveles de Acs.  y su relación con la cura clínica. Materiales y métodos: Se realizaron estudios serológicos a 18  pacientes con leishmaniasis cutánea, que fueron tratados con Sbv. Todos presentaron cura clínica después del tratamiento (ulcera cicatrizada). El tiempo promedio transcurrido postratamiento fue de 26 meses (rango 11-86 meses). Se dispuso, previo al tratamiento, de 14 sueros de los 18 pacientes analizados. La serología para leishmaniasis (ELISA-HPL) se realizó según lo indicado a continuación: - Se adhirió  a la placa 2 µg/pocillo de un homogenado proteico de Leishmania (Viannia) braziliensis (HPL). - Se enfrentó con los sueros diluidos 1/40. – Luego se agregó una anti-IgG  (anticuerpo secundario) marcada con peroxidasa (dilución 1/10.000). – Se reveló la reacción con un  cromógeno-sustrato (mezcla de H2O2  30% y ortofenilendiamina 0.05% en Buffer Citrato- Fosfato). - Se detuvo la reacción con H2SO4 2M y las lecturas de densidades ópticas (DO) se realizaron a 490 nm. Con el propósito de identificar posibles infecciones por T. cruzi en los pacientes leishmaniásicos,  se aplicó la prueba serológica comercial para Chagas,  mediante el uso del kit ELISA Recombinante de Wiener Labs. Los datos fueron analizados con el programa InfoStat Profesional Versión 2007.1. Resultados para  ELISA-HPL: La DO media de los sueros de los pacientes, antes de iniciar el tratamiento,  fue de 1,16 ± 036, mientras que para los sueros  después de finalizar el tratamiento fue 0.53 ± 0.482. Se evidenciaron 4 casos de sueros obtenidos después del tratamiento donde la DO, para la prueba diagnóstica aplicada,  fue superior a 1 (uno). La comparación de las DO medias pre y postratamiento presentaron diferencias estadísticamente significativas (p=0.0013). Para este análisis no se tuvieron en cuenta los 4 casos mencionados anteriormente, porque también fueron reactivos para la prueba  comercial de ELISA-Chagas, insinuando una posible infección mixta. Conclusiones: Los niveles de IgG totales anti-Leishmania (ELISA-HPL), son significativamente inferiores luego de finalizado el tratamiento con Sbv en sueros de pacientes que evidenciaron cura clínica. En aquellos 14 pacientes que resultaron serológicamente negativos para el kit comercial de diagnóstico de Chagas, se observó una correlación directa con los resultados obtenidos cuando se uso el mosaico antigénico de Leishmania V. brasiliensis (HPL). Los sueros de los cuatro pacientes que manifestaron una fuerte reacción para ELISA-HPL luego del tratamiento presentaron, en coincidencia, reacción para el kit comercial para la infección por T. cruzi. Esto puede explicarse de tres maneras: a) infección mixta por T. cruzi y Leishmania spp., b) cruza de reacción y c) combinación de a) y b). Por lo expuesto, es necesaria la confirmación de la infección chagásica por medio de otra prueba diagnóstica confirmatoria, como PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) o TIA (Ensayo de la Inhibición de la Trans-sialidasa). Financiado por el Consejo de Investigación de la Universidad Nacional de Salta (CIUNSa). CONICET.