Evaluación de una prueba de ELISA utilizando un homogenado proteico de Leishmania (Viannia) braziliensis, mediante curvas ROC

CIMINO, R.; PEREYRA, VA; GIL, J.; LOPEZ QUIROGA, I.; FIGUEROA, E; ZACCA, R; ORELLANA, V; JUAREZ, M; ACOSTA, N; CAJAL, P.; TARANTO, N; NASSER, J.

Buenos Aires, Argentina

Simposio; III Simposio Internacional de Epidemiología y II Encuentro Nacional de Epidemiólogos de Campo; 2007

Ministerio de Salud de la Nación

ANTECEDENTES: El principal agente etiológico de la Leishmaniasis Tegumentaria Americana en la Provincia de Salta es Leishmania (V.)braziliensis. Debido al importante número de casos registrados es necesaria una prueba diagnóstica certera para esta infección. La técnica de ELISA representa una alternativa válida para esto debido a su bajo costo, fundamental en las zonas endémicas de bajos recursos, y porque permite un análisis masivo de muestras. En este trabajo se evaluó una prueba de ELISA mediante el análisis de ROC (Reciever Operanting Characterstic), ya que este es un método independiente del punto de corte que determina la confiabilidad de pruebas diagnósticas. Metodología: Se utilizaron 23 sueros de pacientes de Salta (Capital) sin signos aparentes de leishmaniasis como control es negativos(CN), y 23 sueros de pacientes leishmaniásicos confirmados por frotis y/o IRM como controles positivos (CP); ambos grupos no reactivos para los kits de ELISA Chagas Wiener (HOM y REC). Se plaquearon 2 mg/pocillo de un homogenado proteico de L. (V.) braziliensis. La dilución de suero fue de 1/40 y la de anti-IgG humana conjugada con peroxidasa 1/10.000. Se utilizó como cromógeno-sustrato, OPD (ortofenilendiamina) y H2O2 al 30%; se detuvo la reacción con H2SO4 2M. Se registraron densidades ópticas (DO) en lector de ELISA a 490 nm y se analizaron los datos con EPIDAT 3.0.Resultados: La DO media de los CN fue de 0.116 ± 0.067 (rango 0.03-0.321), y en los CP de 0.746 ± 0.435(rango 0.107-1.856).En el análisis de ROC el área bajo la curva fue de 0.97, el intervalo de confianza: 0.94-10.09 (Delong, EE 0.01) y 0.92-10.22 (Hanley & McNeil, EE 0.02).Con un valor de 0.22 como punto de corte, se observó la mayor sensibilidad y especificidad: 91.3%(IC 95%: 89.06-93.55), para ambos parámetros. La concordancia fue de 0.91 y el índice de concordancia Kappa de 0.83, (IC 95%: 0.66-0.99).Los valores predictivos, positivo y negativo, fueron del 91.3%.Conclusiones: De acuerdo con el análisis de ROC, la prueba evaluada tiene una alta performance para el diagnóstico, en las condiciones en las que está normatizada. Esto sugiere que es útil para el seguimiento de pacientes tratados y screening epidemiológico.Palabras clave: Leishmaniasis, Leishmania (V.)braziliensis, ELISA, curvas ROC, Salta.