INVESTIGADORES
MONFERRAN Magdalena Victoria
congresos y reuniones científicas
Título:
Jenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiformes): Una especie centinela en aguas argentinas
Autor/es:
AMÉ M.VALERIA, HUED A.C, BALLESTEROS, M.L; GUYÓN, N.F; ROGGIO, M.A; MONFERRÁN, M.V; PESCE, S.F; WUNDERLIN, D.A Y BISTONI, M.A
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Simposio; SIMPOSIO BIOQUIMICA AMBIENTAL; 2011
Institución organizadora:
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UBA.
Resumen:
Jenynsia multidentata (Anablepidae, Cyprinodontiformes) es un pez vivíparo autóctono que presenta una amplia distribución neotropical,  habitando desde la provincia de Río Negro (Argentina) hasta Río de Janeiro (Brasil). Estudios realizados sobre ensambles de peces en el río Suquía mostraron su presencia tanto en sitios prístinos como con alto grado de contaminación. Esta característica sumada a su alta abundancia en ríos de la provincia de Córdoba, y la facilidad con la que pueden ser transportados y mantenidos en laboratorio propician la utilización de estos organismos como centinelas de contaminación acuática. Sin embargo, el uso de un nuevo organismo indicador requiere de estudios previos para conocer diversos aspectos de su biología como así también conocer sus respuestas biológicas medibles (biomarcadores) al ser expuesto a un tóxico en estudio. Nuestro grupo de trabajo comenzó por realizar ensayos de laboratorio con el fin de evaluar la respuesta de biomarcadores de exposición y de efecto frente a distintos contaminantes. A través de exposiciones durante 24 h a lindano se demostró que concentraciones superiores a 6 µg L-1 activan la enzima Glutatión S-Transferasa (GST), inhibiéndose esta actividad a 75 µg L-1. Coincidentemente, se observó un aumento en la velocidad de acumulación del pesticida en J.multidentata desde el momento en que se observó la inhibición enzimática. El análisis histopatólógico mostró daños fisiológicos reversibles a bajas dosis que se transformaron en daños severos a mayores concentraciones incluyendo fibrosis hepática y presencia de núcleos cariolíticos en cerebro de los individuos expuestos. En condiciones similares se realizó la exposición de J.multidentata a 1,2 y 1,4 Diclorobencenos (DCB) midiendo la respuesta de enzimas antioxidantes así como la determinación de sustancias reactivas con Acido Tiobarbitúrico en hígado, branquias y cerebro. Los resultados obtenidos permitieron concluir que 1,2 DCB sería más tóxico que 1,4 DCB para J.multidentata. El cerebro resultó el órgano más afectado por el estrés oxidativo asociado a la presencia de estos compuestos. El efecto de Endosulfán sobre esta especie fue estudiado en profundidad; demostrando su incorporación, distribución y metabolismo en distintos órganos a distintas concentraciones (desde 0.072 a 1,4 µg L-1). En el mismo rango de concentraciones, se comprobó la activación de enzimas antioxidantes principalmente en hígado y branquias y una disminución en la actividad natatoria dentro de las 24 h de exposición a 1,4. µg L-1. La incorporación, distribución y acumulación en J.multidentata también fueron estudiadas para las cianotoxinas, en particular para Microcistina-RR. Por ensayos de laboratorio se observó la acumulación en hígado branquias, músculo y cerebro. El efecto de esta exposición aumentaría la actividad natatoria de estos organismos a bajas concentraciones y la disminuiría a altas concentraciones, coincidente este último resultado con la activación de GST, enzima involucrada en la detoxificación de estos compuestos. Variaciones en la expresión de la P-glicoproteína asociada al Sistema de Resistencia a Multixenobióticos en J.multidentata fue demostrado para Microcistina-LR por PCR en tiempo real y Western Blot. Para ello  identificamos previamente la secuencia parcial del gen y estudiamos la expresión basal del sistema en este organismo. La importancia de este estudio radicó no sólo incorporar una respuesta biológica plausible de ser utilizada como biomarcador, sino demostrar la presencia de un sistema de resistencia a variados compuestos que podría explicar la capacidad de J.multidentata para sobrevivir en ambientes de alta contaminación. Estos resultados obtenidos en bioensayos indicando a J.multidentata como una posible especie centinela de la contaminación acuática fueron reforzados por un estudio realizado a campo, sobre el río Suquía. Para este trabajo se monitorearon 5 sitios ubicados a lo largo del río durante 2 años analizando en todos ellos la calidad fisicoquímica del agua, el contenido de metales en agua y sedimentos y la actividad de enzimas antioxidantes en distintos órganos de J.multidentata. La intensidad de la respuesta de los biomarcadores utilizados mostró una buena correlación con los distintos niveles de contaminación presentes en el río. El uso conjunto de variables biológicas y fisicoquímicas tradicionales del análisis de aguas permitió caracterizar integralmente cada tramo del río Suquía estudiado. Frecuentemente , los biomarcadores son clasificados como específicos e inespecíficos. El uso de biomarcadores específicos de un tóxico o un grupo de tóxicos es nuestro próximo desafío. Conociendo la presión antrópica que sufren los ríos de Córdoba comenzamos a desarrollar las técnicas necesarias para medir biomarcadores asociados a la presencia de disruptores endócrinos. Se ha observado que determinados tóxicos afectan la expresión y/o actividad de la enzima esteroidogénica aromatasa  P450 (CYP19a), que cataliza la conversión  de andrógenos C-19 en estrógenos C-18. En J.multidentata hemos identificado la secuencia parcial de dos isoformas: Cyp19a1a de expresión predominantemente en gónadas y Cyp19a2b de expresión predominantemente en cerebro. La exposición de machos de J.multidentata a concentraciones ambientalmente relevantes de 17 β-estradiol durante 28 días mostró no sólo un aumento en la expresión de la isoforma cerebral sino alteraciones en otros parámetros indicativos de la biología reproductiva de J.multidentata como la conducta reproductiva y la calidad del esperma. Cambios en la actividad sexual masculina de J. multidentata, sumado a alteraciones histológicas en hígado y branquias se observaron en respuesta a la exposición a una formulación comercial de glifosato. Los  efectos de otros contaminantes ambientales sobre estas respuestas biológicas necesitan aún ser estudiados en bioensayos para poder luego evaluar su utilidad en monitoreos de campo. Futuros estudios que permitan avanzar en el cocimiento de la respuesta de biomarcadores específicos e inespecíficos en J.multidentata, confirmarían que estos organismos son una potencial especie centinela de la contaminación acuática de ríos de regiones neotropicales.