TadG (BJ38) condiciona la infectividad de “Bradyrhizobium japonicum” a raíces de soja.

MONGIARDINI, E.J.; QUELAS, J.I.; PÉREZ GIMÉNEZ, J.; ALTHABEGOITI, M. J.; LÓPEZ GARCÍA, S. L.; LODEIRO, A. R.

Córdoba

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007

Asociación Argentina de Microbiología

  Para estudiar factores de adhesión en la simbiosis Bradyrhizobium japonicum-soja se mutagenizó a un grupo de genes contiguos que codifican proteínas Tad (por tight adhesion), las cuales han sido observadas en otras especies como involucradas en la adhesión firme y colonización del hospedador. Para realizar la mutagénesis se introdujo un cassette de resistencia a kanamicina en reemplazo de las secuencias blr3941-blr3943 (dando la cepa mutante LP 3054) o bien se interrumpió blr3941 por entrecruzamiento simple de un plásmido no replicativo (dando la cepa mutante LP 3050). La secuencia blr3941 está anotada en el genoma de B. japonicum USDA 110 como la proteína TadG, que estaría involucrada en el ensamblaje de los pili y asimismo guarda homología con la proteína BJ38, previamente descripta como interviniente en la adhesión de células de B. japonicum entre sí. La correcta inserción del cassette en reemplazo de los genes mencionados fue corroborada por PCR utilizando primers específicos del cassette o del plásmido, y de las secuencias de ADN de B. japonicum flanqueantes a los sitios de inserción. Ambos mutantes se vieron afectados en su adhesión a raíces de soja, la cual disminuyó significativamente respecto de la cepa silvestre USDA 110 tanto en incubaciones cortas (4 horas) como largas (24 horas). Sin embargo, la formación de biofilms a tiempos más prolongados no se vio afectada. Los nódulos formados en plantas de soja por los mutantes fueron normales tanto en su morfología externa como en su ultraestructura, pero la infectividad de los mutantes se vio reducida en un 60 % respecto de la cepa parental silvestre. Estos resultados muestran que TadG interviene en el proceso de adhesión de B. japonicum a raíces de soja, y que dicha adhesión condiciona la posterior eficiencia de nodulación. Por lo tanto, esta proteína puede resultar importante en la competición para la nodulación.