INVESTIGADORES
KIKOT Pamela Alejandra
convenios, asesorías y/o servicios tecnológicos
Título:
Producción de Proteína Green Fluorescent Protein 6xHis (GFP)
Autor/es:
PAMELA KIKOT; MARIANO GRASSELLI
Fecha inicio:
2023-07-01
Fecha finalización:
2023-07-01
Campo de Aplicación:
Sanidad animal
Descripción:
Plan de trabajoEl servicio consiste en la producción, purificación y acondicionamiento de la proteína GFPrecombinante conteniendo una etiqueta de seis histidinas. La misma fue producida por unclon de E.coli de propiedad de nuestro laboratorio.Cronograma de actividades● Cultivo del clon productor e inducción de la producción de la proteína recombinante● Ruptura celular mediante homogeneización de alta presión y clarificación pormicrofiltración o centrifugación● Captura de la GFP por cromatografía de iones metálicos inmovilizados (IMAC)● Pulido mediante cromatografía de intercambio iónico● Desalado y acondicionamiento mediante cromatografía de exclusión molecular obien por ultrafiltración● Análisis de pureza del producto obtenido (SDS-page), determinación del contenidode proteínas (absorbancia a 280 nm) y de actividad (fluorescencia relativa)Se entregò a La Empresa 1 mg de la proteína purificada y congelada en unaconcentración aproximada de 1 mg/ml en solución de buffer fosfato salino (PBS).
