La vía de señalización celular Banded Hedgehog en Xenopus laevis: estudios funcionales e identificación de nuevos componentes

TRISTÁN H. AGÜERO; JUAN P. FERNÁNDEZ; MANUEL J. AYBAR

Universidad de San Luis

Congreso; XXXV Congreso Argentino de Genética (SAG); 2006

En el desarrollo embrionario la familia de proteínas hedgehog representa una señal celular instructiva que controla la especificación, la proliferación y la supervivencia celular. Los genes de los componentes de la vía de señalización hedgehog de distintas especies presentan un alto grado de conservación en sus funciones. En el anfibio Xenopus laevis los morfógenos secretados son sonic hedgehog, cephalic hedgehog y banded hedgehog (bhh). En nuestro laboratorio hemos encontrado que algunos componentes de la vía de señalización bhh se expresan en la cresta neural, sugiriendo su participación en los procesos del desarrollo de este tejido. Para evaluar la función de la vía bhh en el desarrollo de la cresta neural se llevó a cabo una aproximación de ganancia y pérdida de función por microinyección en embriones en estadio de 8-16 células. Los resultados mostraron que un incremento de la señal bhh lleva a un aumento de la expresión de los genes Gli y de marcadores de cresta neural. Por el contrario, la microinyección de dominantes negativos y de oligonucleótidos antisentido tipo morfolino contra bhh y Gli3 demostró que esta vía es requerida para el normal desarrollo de la cresta neural. Por otra parte, se llevó a cabo un rastreo que permitió el aislamiento de clones que codifican proteínas reguladoras intracelulares de la vía hedgehog. El análisis de restricción y secuenciamiento de los cADNs aislados permitió identificar a los homólogos de Costal2 (3647 pb) y Suppressor of Fused (4265 pb). En forma conjunta, nuestros resultados demuestran que la vía bhh/Gli es fundamental para la especificación y el desarrollo de la cresta neural en Xenopus.