Caracterización estructural del ectodominio del receptor IA-2beta

NOGUERA MARTÍN EZEQUIEL; PRIMO MARÍA EVANGELINA; SOSA LAURA N.F.; POSKUS EDGARDO; ERMÁCORA MARIO ROBERTO

Buenos Aires

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

IA-2beta es un proteína tirosina fosfatasa tipo receptor (PTPR) que se encuentra en los gránulos de secreción de las células beta pancreáticas y otras células de origen neuroendócrino. Es un marcador de diabetes autoinmune, y está involucrada en la secreción de insulina y en la proliferación de las células beta pancreáticas. Posee un péptido señal, un ectodominio, una región transmembrana y un dominio tirosina fosfatasa. IA-2beta comparte sus propiedades funcionales, arquitectura y localización celular con otro miembro de las PTPR llamado IA-2. Anteriormente demostramos que IA-2 posee un dominio estable en la región C-terminal de su ectodominio que forma homodímeros posiblemente involucrados en su función biológica1. En este trabajo mostramos que el segmento C-terminal del ectodominio de IA-2beta también posee una región de plegado autónomo. Para este fin, se clonó y expresó en E. coli un fragmento de IA-2beta humana de la misma extensión que el estudiado para IA-2. La estructura secundaria y terciaria se estudió mediante espUV lejano y cercano, y es consistente con una ealfa+beta. Además, este segmento no une ANS, y por regiones hidrofóbicas. Experimentos de proteólisis conttambién indican una estructura compacta. La estabilidadeterminó por desnaturalización térmica y química, obsreversibilidad y alta cooperatividad y estabilidad. Aobtuvieron cristales de este fragmento en diversas determinación de su estructura tridimensional esconocimiento de las propiedades estructurales del ectcontribuirá, junto con el ya ganado para IA-2, a aclarar estas moléculas en los mecanismos de secreción celular. 1. Primo, M. E., S. Klinke, et al. (2008) J Biol Chem. 283(8):4674-81.