REGULACION POR TESTOSTERONA DE LA EXPRESION FUNCIONAL DE CANALES DE CALCIO DE TIPO N

SI NUDLER, MR PAGANI, FJ URBANO Y OD UCHITEL

Vaquerías, Córdoba

Taller; VI Taller Argentino de Neurociencias; 2004

Abstract. Las hormonas esteroideas, actuando durante el desarrollo, producen diferencias sexuales importantes en el sistema nervioso. La médula espinal de la rata (en sus segmentos quinto y sexto) contiene un núcleo de motoneuronas sexualmente dimórfico, el núcleo espinal del bulbocavernoso (SNB) que inerva al músculo perineal levator ani (LA). Tanto el núcleo como la musculatura son altamente dependientes de andrógenos para su desarrollo y mantenimiento.Asimismo, hay evidencias de efectos de las hormonas esteroideas sobre la expresión de genes que codifican para ciertos canales de calcio dependientes de voltaje (CCDV). En el presente trabajo hemos estudiado la identidad de los CCDV que median la liberación de neurotransmisor en la unión neuromuscular (UNM) del SNB-LA y la interacción de este perfil con los niveles de testosterona plasmática. Hemos podido establecer que (en el LA de ratas adultas) hay una fuerte inhibición de la liberación por 120 nM de ω-Agatoxina IVA ( -Aga IVA)), un bloqueante específico de los canales de tipo P/Q, así como un fuerte efecto de 2 µM de ω-Conotoxina GVIA (ω-CgTx GVIA), un bloqueante específico de los CCDV de tipo N. El fuerte efecto inhibitorio de la ω-Aga IVA es coincidente con resultados previos obtenidos en diferentes tipos de UNM de mamíferos pero el efecto inhibitorio de la  -CgTx GVIA difiere con los reportes previos, aunque está en línea con los efectos observados en UNM de mamíferos neonatos. Sin embargo, realizando los mismos estudios en el SNB-LA de ratas castradas observamos la pérdida de la sensibilidad a la ω-CgTx GVIA, lo cual indica una probable regulación por testosterona de la expresión funcional del canal N. Consistente con esta hipótesis, la restitución de testosterona en los animales castrados (mediante administración subcutánea) induce la reaparición (en el 60% de los casos) de la sensibilidad a  ω-CgTx GVIA.A fin de evaluar la expresión y localización de los CCDV en la UNM del SNB-LA, se utilizaron anticuerpos específicos sobre secciones transversales de músculos LA contra las subunidades  (CNA1) y    (CNB1 y CNB2) formadoras del poro de los canales P/Q y N α1A y α1B respectivamente. En músculos  de animales normales se confirmó la presencia de los CCVD de tipo P/Q y de tipo N tal como surge de la evidencia farmacológica. Por otra parte, en la UNM de animales castrados resultados preliminares mostraron una importante disminución de la intensidad de la marca  correspondiente al canal N. Estos resultados estarían indicando que la testosterona modula los niveles de expresión de los CCDV de tipo N en la UNM del SNB-LA.