El 17beta -estradiol regula la trascripción y estabilidad del ARNm de las subunidades alfa1 y beta1 de la guanilil ciclasa sensible a oxido nítrico en adenohipofisis

CABILLA J; RONCHETTI S; QUINTEROS F; NUDLER S; MILER E; DUVILANSKI B

Mar del Plata

Congreso; LIV REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

El estrógeno (E2) regula la liberación hormonal así como tambien la proliferacion y la muerte celular adenohipofisaria. La guanilil ciclasa soluble (sGC) cataliza la formación de GMPc y esta compuesta por 2 subunidades, alfa y beta, siendo alfa1/beta1 el heterodimero mas activo y ubicuo. Previamente mostramos que la administracion de E2 causa un efecto opuesto sobre las subunidades de la sGC, aumentando los niveles de ARNm y proteina de la subunidad alfa1 y disminuyendo los de beta1 y la actividad enzimatica global. Objetivo: investigar los mecanismos por los cuales el E2 regula diferencialmente la expresion de las subunidades de la sGC en adenohipofisis. Materiales y Métodos: Los cultivos primarios de células adenohipofisarias se incubaron durante 6 u 8 h con E2 10-9 M en presencia o ausencia de diferentes drogas. Se evaluaron los niveles de ARNm por PCR semicuantitativa o proteina por western blot de alfa1 y beta1. El tratamiento con E2-BSA (10-9 M,incapaz de atravesar la membrana celular) no modifico los niveles de ARNm de alfa1 ni beta1. El tratamiento con actinomicina D (2 µM, inhibidor de la transcripción) revirtio parcialmente el aumento del ARNm de la subunidad alfa1 y la disminución de la beta1 causado por E2. La cicloheximida (10 µg/ml, inhibidor de la traducción) revirtió completamente el desbalance en la expresion de los ARNm de alfa1 y beta1 inducido por E2. El tratamiento con E2 disminuyo la expresion del ARNm del factor HuR y aumento la del AUF1(factores de estabilizacion de ARNm).Conclusion: el E2 ejerce sus efectos sobre la expresion de las subunidades de la sGC a través del receptor intracelular. Este efecto depende parcialmente de la transcripcion y de la traduccion de novo de las subunidades y de ciertos factores reguladores. El E2 promueve un ambiente de desestabilizacion de ARNm que se corresponde con la disminucion de los niveles de beta1. Estos Resultados muestran que la sGC sufre una compleja regulación por parte del E2 y sugieren un papel clave en la fisiologia adenohipofisaria.