ÍNDICE OXIDATIVO DE DAÑO CELULAR COMO HERRAMIENTA A SER APLICADA EN LOBOS MARINOS EN REHABILITACIÓN.

POLIZZI PAULA; ROMERO, MA. BELEN; RODRIGUEZ HEREDIA, SERGIO; LOUREIRO, JULIO; RODRIGUEZ, DIEGO; GERPE, MARCELA

Congreso; 3º Congreso Latinoamericano de rehabilitación de fauna marina; 2014

Los organismos marinos están expuestos a diversos estresantes tanto naturales como antrópicos (virosis, parasitosis, contaminantes, cambios ambientales, etc.) y como consecuencia se observa estrés oxidativo. Esta alteración se produce por un desbalance entre los prooxidantes (ROS, especies reactivas de oxígeno) y los sistemas antioxidantes (enzimas, glutatión, vitaminas D y E, entre otros). Una manera de evaluación es mediante los biomarcadores, los cuales son respuestas a nivel bioquímico, molecular, celular y/o fisiológico que brindan información sobre alteraciones en los sistemas biológicos. La peroxidación de lípidos de membrana (LPO) es una de las consecuencias comúnmente observables del estrés oxidativo, cuyo producto final es el malondialdehído (MDA). Éste reacciona con el ácido tiobarbitúrico (TBA) formando especies reactivas (TBARs) las cuales se detectan por técnicas simples de espectrometría o fluorometría. Por lo tanto, la determinación de TBARs constituye un biomarcador de efecto ante el estrés oxidativo. Los niveles de LPO en eritrocitos están relacionados con la producción de ROS del metabolismo celular sanguíneo. En cambio, las concentraciones detectadas en plasma, por tratarse de una fracción acelular, se relacionan con el daño en la membrana celular de diferentes tejidos, liberándose MDA al torrente sanguíneo. En base estudios realizados sobre Otaria flavescens y Artocephalus australis de colonias naturales, el objetivo de esta presentación es proponer la aplicación de un índice de estrés oxidativo celular en ejemplares en rehabilitación. Las muestras de sangre fueron obtenidas de ejemplares de O. flavescens y A. australis de colonias naturales de Uruguay. Los lobos marinos correspondieron a ejemplares jóvenes, saludables y sin patologías observables a ojo desnudo (calificación clínica veterinaria ASA 1, American Society of Anesthesiology). Los ejemplares fueron anestesiados por vía gaseosa con isofluorano -1-cloro, 2,2,2 trifluoroetildifluorometileter-, mediante mascarilla y posterior entubamiento. La sangre fue extraída de una vena periférica de las aletas anteriores con jeringas heparinizadas. Posteriormente, la sangre fue centrifugada a 3.000 rpm durante 10 min para la obtención de las fracciones eritrocitaria y plasmática, siendo congeladas inmediatamente en nitrógeno líquido. Los niveles de MDA fueron cuantificados espectrofotométricamente a través de la concentración de TBARs. Las concentraciones de LPO en plasma fueron superiores a las correspondientes en eritrocitos. Además, estas últimas fueron similares entre los ejemplares muestreados, en contraste con la alta variabilidad encontrada en la fracción plasmática. Estos resultados fueron observados en las dos especies analizadas. Por lo encontrado y la carencia de valores de referencia, la información que se obtiene analizando una única fracción sanguínea no reflejarían el estado oxidativo del organismo. Por lo que se sugiere un índice de daño celular oxidativo = (LPOp / LPOe), donde LPOp es la concentración en plasma y LPOe en eritrocito. Habiéndose probado la aplicación de este índice en animales sanos de colonias naturales, se propone su implementación en lobos marinos en rehabilitación, ya que permitiría conocer de manera conjunta con parámetros clínico-veterinarios de rutina, la condición óptima para su reincorporación al ambiente natural.