Valoración Histoquímica del glucógeno hepático en cobayos intoxicados con Ipomoea carnea

CHOLICH, L; DUBIEL C; PISTÁN M; GARCÍA ENRIQUE N; LOZINA L

Corrientes

Jornada; XXXIV Sesión de Comunicaciones Científicas de la Facultad de Ciencias Veterinarias.; 2013

Facultad de Veterinaria -UNNE

La intoxicación por Ipomoea carnea ocurre en rumiantes luego de varias semanas de ingestión. En la planta se identificaron los alcaloides swainsonina (SW) y calisteginas, quienes inhiben a las enzimas α-manosidasa, α y β-galactosidasa y β-glucosidasa lisosomal, esto ocasiona trastornos en el metabolismo celular y produce vacuolización citoplasmática en la mayor parte de las células del organismo que causan signos clínicos y modificaciones enzimáticas en el animal intoxicado. Recientemente hemos presentado los cambios histológicos del hígado de cobayos intoxicados con Ipomoea, acompañado de análisis bioquímicos. En el presente trabajo nos proponemos determinar de forma objetiva la cantidad de glucógeno hepático depositado en cada grupo experimental y compararlo con animales controles, mediante un analizador digital de imagen. Los animales fueron divididos en grupos experimentales, tres grupos recibieron hojas secas de Ipomoea mezcladas con alimento balanceado para cobayos y un cuarto grupo fue alimentado solo con alimento balanceado. Al final de la experiencia cada grupo fue sacrificado en distintos momentos, siendo el primer grupo sacrificado a los 20 días, el segundo a los 40 días y el tercero a los 60 días. Cada animal previo al sacrificio fue anestesiado, muestras de hígado fueron fijadas en formol y procesadas según las técnicas clásicas para bloques parafinados, posteriormente se tiñeron con acido periódico de schiff (PAS). Finalmente, se obtuvieron micrografías ópticas del tejido hepático con aumento de hasta 40X en un microscopio óptico asociado a una cámara de captura de imagen, se analizaron 50 campos por grupo experimental. Se realizó el análisis de las fotografías mediante el programa Image Pro Plus 4.5 media cybernetics, el mismo consistió en la valoración del color marcado por PAS, como glucógeno, teniendo en cuenta el rango de pixeles que ocupaban estas zonas en una escala de grises, lo cual se tradujo en porcentaje de marcación del campo microscópico. En los hígados de los animales experimentales con distintos tiempos de intoxicación, se observó la presencia de cantidades variables de glucógeno en el interior de los hepatocitos, siendo el porcentaje inferior (2,94±0,75) para el grupo de animales con 60 días de intoxicación, comparado con el grupo control obteniendo un porcentaje de 21,55± 0,78. Estos resultados se traducirían en una evidente inhibición enzimática lisosomal, ocasionada por los principios tóxicos (SW), que ocasionan formación de vacuolas citoplasmaticas ricas en oligosacaridos, principalmente en manosa, por lo que el órgano carece de reserva de glucógeno (carbohidrato complejo), especialmente a los 60 días de intoxicación.