Modulación post-ingesta de la actividad de amilasa y N-aminopeptidasa (APN) en intestino del lenguado (Paralichthys orbignyanus)

ALBANESI,C.; LOPEZ MAÑANES, A.A.; RADONIC, M; LOPEZ,A

Mar del Plata

Encuentro; XII Encuentro Biólogos En Red; 2017

El lenguado Paralichthys orbignyanus desempeña un importante rol ecológico y es de gran potencialpara la acuicultura. Faltan estudios sobre ajustes postprandiales en la actividad de enzimasdigestivas clave como amilasa y APN. Las α-amilasas, por su rol en pasos iniciales de la digestiónde sustratos glucogénicos dietarios tienen una importancia fisiológica central en el metabolismo dehidratos de carbono. La APN, una ectopeptidasa que juega un rol esencial en pasos finales de ladigestión proteica produciendo di/tripéptidos y aminoácidos libres, se utiliza como indicador de lacapacidad de digerir proteínas. Determinamos la actividad de amilasa y APN a diferentes tiemposluego de la ingesta de alimento en intestino de juveniles (n=32). Los individuos fueron alimentados(41,8% hidratos de carbono; 2,8% lípidos; 46% proteínas). Se determinó la actividad de amilasa yAPN inmediatamente (t0), a corto (t24/t72h) y largo plazo (t360h) post-ingesta. Se trabajó consobrenadante (10000xg15min) de homogenato de intestino anterior (Tris-HCl 0,1M, pH7,4) (4ml x gtejido-1). La actividad de amilasa (μgmaltosa x min-1 x mgproteina-1) se cuantificó por hidrólisis dealmidón en buffer fosfato 50mM a 30ºC pH7.4 La actividad de APN (μmoles x min-1 x mgproteína-1)se cuantificó colorimétricamente por hidrólisis de L-alanina-p-nitroanilida (L-Ala pNA) en Tris/HCl50mM a 45ºC pH7,4. Las actividades de amilasa y APN disminuyeron a 72h (Amilasa t0: 98- t72: 64;APN t0: 1,08- t72: 0,70) y se mantuvieron constantes a 360h (Amilasa t360: 64- APN t360: 0,71)(Test de ANOVA p