METABOLISMO DE ACIDOS GRASOS EN Streptomyces coelicolor Y SU INFLUENCIA EN LOS PROCESOS DE DIFERENCIACIÓN.

CATALANO DUPUY, DANIELA L; BANCHIO, CLAUDIA E; GRAMAJO, HUGO C

Mendoza.

Congreso; XXXV Reunión Anual de SAIB; 1999

Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular

Streptomyces son bacterias abundantes en los suelos y se caracterizan por utilizar una amplia gama de sustratos insolubles como fuente de carbono. La liberación de lipasas extracelulares les permite crecer con lípidos complejos como fuente de carbono y energía. Tanto los ácidos grasos exógenos como los sintetizados de novo, en determinadas condiciones, y durante la fase exponencial de crecimiento, se acumulan como triacilglicéridos de reserva. La degradación de los ácidos grasos proveniente de los triacilglicéridos generaría el acetil-CoA necesario tanto para la generación de energía en la esporulación como la generación de malonil-CoA utilizado para la síntesis de antibióticos policetónicos. La primera enzima de la vía de b-oxidación, acyl-CoA sintetasa, es la responsable de la activación de ácidos grasos a ésteres de CoA. Para su estudio se realizaron ensayos enzimáticos sobre extractos crudos de S. coelicolor, obtenidos a diferentes puntos de la curva de crecimiento. Los resultados muestran una regulación fase de crecimiento dependiente de la enzima, obteniéndose durante la  fase exponencial tardía un máximo de actividad (cuando la fuente de carbono es oleato), mientra que la actividad obtenida en extractos crecidos con glucosa muestran una actividad sostenida hasta fase estacionaria tardía. Por metodología de PCR se clonó un gen con alta homología a la enzima acyl-CoA sintetasa de M. tuberculosis y B. subtilis. Con dicho gen se complementó la mutante fadD de E. coli y se realizaron ensayos cinéticos utilizando como sustratos ácidos grasos de diferente longitud de cadena carbonada. Actualmente se está construyendo una mutante por disrupción del gen en Streptomyces coelicolor para determinar la influencia de esta enzima y de la ruta catabólica sobre la producción de antibióticos policetónicos y sobre la esporulación.