MECANISMOS DEPENDIENTES E INDEPENDIENTES DE PKA COOPERAN EN LA INDUCCIÓN DE LA EXPRESIÓN DEL GEN DE LA MAP QUINASA FOSFATASA-1 (MKP-1) POR ACTH EN CÉLULAS ADRENOCORTICALES DE LA LÍNEA Y1.

BEY PAULA, GOROSTIZAGA ALEJANDRA , MALOBERTI PAULA , CASTILLA LOZANO ROCÍO, PODEROSO CECILIA, CORNEJO MACIEL FABIANA, PODESTÁ ERNESTO, PAZ CRISTINA

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; XLVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2002

SAIC

El mecanismo de acción de ACTH incluye la desfosforilación de proteínas por fosfatasas dependientes de ACTH. El objetivo de este trabajo fue determinar si la MAP quinasa fosfatasa-1 (MKP-1), una fosfatasa de especificidad dual involucrada en la inactivación de MAP quinasas, integra el mecanismo de acción de ACTH. Mediante Western y Northern blot analizamos los niveles de la proteína y del ARNm de MKP-1 en células de la línea Y1. ACTH incrementó transitoriamente los niveles de la proteína y del mensajero. El efecto sobre el mensajero fue dependiente de la concentración y alcanzó el máximo valor a la hora de estimulación (ACTH 25 mUI/ml = 6,20 ± 0,31 vs. Control =1,10 ± 0,10 unidades arbitrarias, P< 0,001). Actinomicina D anuló el efecto de ACTH indicando una acción hormonal a nivel transcripcional. El 8Br-AMPc también aumentó los niveles del ARNm, con una cinética similar a ACTH pero con menor potencia (4-veces). Inhibidores de PKC (Ro-31-8220) y PKA (H-89) redujeron el efecto de ACTH. H-89 bloqueó el efecto del 8Br-AMPc pero redujo sólo parcialmente el de ACTH. El incremento de calcio intracelular y la activación de PKC-sin tener efecto per se- potenciaron el efecto de ACTH y de 8Br-AMPc, sugiriendo el rol fundamental de PKA en la inducción de MKP-1 por ACTH. Estos resultados indican que la MKP-1 es un componente adicional del mecanismo de acción de ACTH y sugieren además que mecanismos dependientes e independientes de PKA cooperan en la regulación de MKP-1 por ACTH.