Modulación de la actividad de serina/treonina fosfatasas en la estimulación hormonal de la esteroidogénesis en células de Leydig de la línea MA-10.

CECILIA PODEROSO(1), ALEJANDRA B. GOROSTIZAGA(1), FABIANA CORNEJO MACIEL(1), CRISTINA PAZ(1), ERNESTO J. PODESTÁ

Mar del Plata

Congreso; XLVI Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2001

SAIC

Previamente demostramos que el grado de fosforilación de proteínas en tirosina en células esteroidogénicas es dependiente de la acción hormonal mediante la modulación de la actividad de proteína tirosina fosfatasas. El objetivo de este trabajo fue analizar la actividad diferencial de dos serina/treonina fosfatasas PP1 y PP2A durante la estimulación aguda de la esteroidogénesis (5-60 min) por AMPc en células de Leydig de la línea MA-10. La actividad enzimática de PP1 y PP2A expresada como nmoles de fosfato liberados/min.mg de proteína fue discriminada mediante la utilización de ácido okadaico, un inhibidor con mayor IC50 para PP1 que para PP2A. El 8BrAMPc no modificó la actividad de PP1 (Control: 5 min: 1,23 ± 0,02; 15 min: 1,25 ± 0,03; 30 min: 1,30 ± 0,05; 60 min: 1,28 ± 0,07; 8BrAMPc: 5 min: 1,53 ± 0,19; 15 min: 1,61 ± 0,52; 30 min: 1,56 ± 0,24; 60 min: 1,59 ± 0,07). En cambio, la actividad de PP2A disminuyó a tiempos cortos de estimulación respecto del control (5 y 15 min) y luego (30 y 60 min) se normalizó: control: 5 min: 2,67 ± 0,14; 15 min: 2,8 ± 0,1; 30 min: 2,4 ± 0,1; 60 min: 2,59 ± 0,09; 8BrAMPc: 5 min: 1,4 ± 0,6 (P<0,01); 15 min: 1,77 ± 0,52 (P<0,05); 30 min: 2,01 ± 0,29; 60 min: 3,1 ± 0,3). La inmunoprecipitación de la PP2A y posterior Western-blot reveló la presencia de fosfoserina y ausencia de fosfotirosina. Los resultados sugieren que en células de Leydig además de la estimulación de tirosina fosfatasas existe una modulación de la actividad de PP2A vía PKA.