INVESTIGADORES
PODEROSO Cecilia
congresos y reuniones científicas
Título:
La activación de ERK1/2 mitocondrial es estrictamente requerida para la esteroidogénesis dependiente de PKA en células MA-10
Autor/es:
PODEROSO CECILIA, CONVERSO DANIELA, GALLI SOLEDAD, RODRIGUEZ VICTORIA, PAZ CRISTINA, CARRERAS MA CECILIA, PODEROSO JUAN JOSE, PODESTA ERNESTO
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2006
Resumen:
La etapa temprana de la esteroidogénesis ocurre en
mitocondria e involucra la activación de la proteína StAR
(Steroidogenic Acute Regulatory) que participa en el transporte
de colesterol a la membrana mitocondrial interna, paso limitante
en la síntesis de esteroides. Nuestro grupo y otros han descripto
que ERK1/2 (extracellular signal-regulated kinases, una MAP
quinasa) se activa por fosforilación en mitocondria. Con el objetivo
de investigar efectos de ERK1/2 mitocondrial en la esteroidogénesis,
células MA-10 (línea de células de Leydig murinas) se
estimularon con hCG (Gonadotrofina Coriónica humana) u 8Br-
AMPc (análogo permeable del AMPc) en presencia o ausencia de
inhibidores de MEK1/2 (ERK1/2 quinasa), PD98059 (PD) y U0126
(U0). Ambos compuestos inhibieron la esteroidogénesis estimulada
hormonalmente sin afectar los valores basales de esteroides,
a los 15 minutos: control=0,14± 0,06; 8Br-AMPc=0,7 ± 0,14; 8Br-
AMPc + PD=0,21 ± 0,07; 8Br-AMPc + U0=0,18 ± 0,03 y a los 60
min.: control=0,17 ± 0,03; hCG=5,28 ± 1,70; hCG + PD=0,82 ±
0,26; hCG + U0=0,47 ± 0,15; 8Br-AMPc=3,16 ± 0,80; 8Br-AMPc
+PD=0,21 ± 0,06; 8Br-AMPc + U0=0,21± 0,05 ng de progesterona/
ml (p< 0,05). Se observó la fosforilación de ERK1/2 siendo máxima
a los 5 minutos de estimulación disminuyendo a niveles
basales a 1 hora sin afectar la cantidad de ERK1/2 total. Una curva
de activación similar se encontró en fracciones mitocondriales
puras, detectada por inmunoblot o por inmunohistoquímica. La
activación de MEK1/2 también fue observada en mitocondrias de
MA-10 estimuladas con 8Br-AMPc, consecuente con el perfil de
activación de ERK1/2 mitocondrial. La fosforilación en mitocondria
tanto para MEK1/2 como ERK1/2 por AMPc fue inhibida por H-
89, inhibidor permeable de PKA. En base a estos resultados, se
infiere que la activación sostenida de MEK1/2 y ERK1/2 en la
mitocondria vía PKA se requiere para el transporte de colesterol
dependiente de StAR y esteroidogénesis estimulada
hormonalmente en células MA-10.