La interaccion de PKA, MEK y ERK en mitocondrias regula el trasnporte de colesterol para la bios¡§ªntesis de esteroides

PODEROSO C, CONVERSO D, MALOBERTI P, DUARTE A, NEUMAN I, GALLI S, CORNEJO MACIEL FC, PAZ C, CARRERAS MC, PODEROSO JJ AND PODESTA EJ

Pinamar, Buenos Aires

Otro; I Reunion Anual del IIMHNO; 2008

IIMHNO

En este trabajo hemos estudiado la activacion de las ERK1/2, representativas de la familia de  este trabajo hemos estudiado la activacion de las ERK1/2, representativas de la familia de  MAP quinasas (MAPKs) en una linea murina de celulas de Leydig MA10 y su relacion  funcional con la esteroidogenesis. Luego de la estimulacion hormonal de las  celulas MA10 se monitoreo la distribucion subcelular de fosfoERK1/2 por inmunoblot y  microscopia confocal. Se hallo que bajo estimulacion con la hormona gonadotrofina corionica  (hCG) u 8BrAMPc (un analogo permeable del segundo mensajero, AMPc) ERK1/2 es  activada y retenida en mitocondria por efecto de PKA mediado por el aumento de fosfo-MEK1/2 (quinasa rio arriba de ERK1/2) en mitocondria.  Uno de los factores que incrementa el transporte de colesterol a la mitocondria y la produccion  de esteroides es la proteina SAR (Steroidogenic Acute Regulatory). Hallamos que la estimulacion  hormonal promueve su interaccion con ERK dado que StAR posee un dominio de interaccion  para MAPKs Demostramos que ERK1 fosforila StAR in vitro en el residuo de Serina232 solo  en presencia de colesterol. Se determino su importancia dado que la mutacion de este residuo disminuye marcadamente la esteroidogenesis in vivo,  evita la   evita la  fosforilacion por ERK1 y mitocondrias aisladas consiguen la maxima produccion de  progesterona solo con colesterol mas ERK1 y PKA activas.   Con estos resultados concluimos que la doble fosforilaci¨®n de StAR unida a colesterol por ERK y PKA en mitocondria permitir¨ªa a interacci¨®n de StAR con VDAC (voltage©\dependent anion channel) asociado a multicomplejos mitocondriales, favoreciendo el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna y el mantenimiento de la esteroidog¨¦nesis.Con estos resultados concluimos que la doble fosforilaci¨®n de StAR unida a colesterol por ERK y PKA en mitocondria permitir¨ªa a interacci¨®n de StAR con VDAC (voltage©\dependent anion channel) asociado a multicomplejos mitocondriales, favoreciendo el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna y el mantenimiento de la esteroidog¨¦nesis. que la mutacion de este residuo disminuye marcadamente la esteroidogenesis in vivo,  evita la  fosforilacion por ERK1 y mitocondrias aisladas consiguen la maxima produccion de  progesterona solo con colesterol mas ERK1 y PKA activas.   Con estos resultados concluimos que la doble fosforilaci¨®n de StAR unida a colesterol por ERK y PKA en mitocondria permitir¨ªa a interacci¨®n de StAR con VDAC (voltage©\dependent anion channel) asociado a multicomplejos mitocondriales, favoreciendo el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna y el mantenimiento de la esteroidog¨¦nesis.Con estos resultados concluimos que la doble fosforilaci¨®n de StAR unida a colesterol por ERK y PKA en mitocondria permitir¨ªa a interacci¨®n de StAR con VDAC (voltage©\dependent anion channel) asociado a multicomplejos mitocondriales, favoreciendo el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna y el mantenimiento de la esteroidog¨¦nesis.  Con estos resultados concluimos que la doble fosforilaci¨®n de StAR unida a colesterol por ERK y PKA en mitocondria permitir¨ªa a interacci¨®n de StAR con VDAC (voltage©\dependent anion channel) asociado a multicomplejos mitocondriales, favoreciendo el transporte de colesterol a la membrana mitocondrial interna y el mantenimiento de la esteroidog¨¦nesis.