Evolución de la Proteína Latente de Membrana 1 del Virus de Epstein Barr

GANTUZ MAGDALENA; LORENZETTI MARIO ALEJANDRO; ALTCHEH JAIME; DE MATTEO ELENA; CHABAY PAOLA ANDREA; PRECIADO MARIA VICTORIA

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Microbiología

El Virus de Epstein Barr (EBV) es un gamaherpesvirus linfotrópico, agente etiológico de la Mononucleosis infecciosa (MNI), asociado a diversas neoplasias. La Proteína Latente de Membrana 1 (LMP1) es la proteína viral con mayor capacidad oncogénica, simula al receptor celular CD40 constitutivamente activo de una forma independiente de ligando para estimular múltiples vías de señalización promoviendo así el crecimiento y la transformación celular e inhibición de la apoptosis. LMP1 es una de las proteínas del EBV con mayor variabilidad genómica, incluso la intra-individuo fue comparable con la observada en la infección inicial por ciertos ARN virus como West Nile Virus o HIV. Las causas por las cuales el EBV contribuye a la patogénesis de diferentes procesos neoplásicos están aún en discusión, la identificación de variantes específicas de LMP1 asociadas a tumores aportaría algunas respuestas a este interrogante. El objetivo del trabajo fue estudiar la diversidad y evolución de las variantes de LMP1 circulantes en Argentina y determinar su asociación a neoplasias en pacientes pediátricos. En muestras pediátricas EBV+ (20 de sangre periférica de MNI, 27 biopsias ganglionares de linfomas y 14 de hiperplasia reactiva), se amplificó el gen BNLF1 (proteína LMP1) completo por PCR anidada. Se realizó la reconstrucción filogenética por Máxima Verosimilitud (PhyML) incluyendo aislamientos de GenBank. La fecha de toma de muestra (desde 1972 a 2013) se utilizó como tiempo de calibración para inferir la tasa de evolución y el tACMR utilizando BEAST. La Selección Molecular se analizó con HyPhy en el servidor web Datamonkey. Se identificaron un aislamiento mayoritario (47,54%), que se denominó variante Argentina, relacionado a la variante Raji, y resultó de circulación predominante en nuestra región y también en menor medida otras variantes previamente descriptas como B95.8, Alaskan y China2. No se observó asociación entre las variantes filogenéticas y alguna de las condiciones patológicas estudiadas, dado que las mismas se distribuyeron uniformemente entre los grupos con condición benigna, maligna y portadores sanos. El análisis filogeográfico, incluyendo aislamientos de otras regiones del mundo, mostró una estructura compleja en la cual algunas variantes tuvieron distribución global y otras restringida a una región, como la variante Argentina y las asiáticas. En cuanto a la evolución de LMP1, se observó una tasa acelerada en comparación a lo esperado para virus ADN, 1,394 x 10-4 subs/sitio/año (0,658-2,276 x 10-4 subs/sitio/año, 95% HPD), pero fue concordante con observaciones previas para ciertas proteínas de latencia de EBV. La edad estimada para el tACMR fue de 489 años. Se evidenció presión de selección sobre codones específicos tanto positiva como negativa sugiriendo que podría estar involucrado en la alta tasa de sustitución calculada. El análisis de variantes de LMP1 identificó una nueva variante de circulación en nuestra región y confirmó el alto grado de variación descripto para esta proteína.