INVESTIGADORES
ARIAS Diego Gustavo
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización funcional de una metionina sulfóxido reductasa hibrida de Trypanosoma cruzi Dm28c
Autor/es:
GONZALEZ, LN; BIROCCO, F; GUERRERO, SA; IGLESIAS, AA; ROBELLO, C; ARIAS, DG
Reunión:
Congreso; IX Congreso Internacional de Parasitología Neotropical, ?Ciencia e Investigación en parasitología Creando redes para la salud?; 2021
Institución organizadora:
Universidad Autónoma del Carmen, México
Resumen:
La free metionina sulfoxido reductasa (fMSR) cataliza la reducción de Met(R)SO libre. Trypanosoma cruzi es el agente etiológico de la enfermedad de Chagas y es auxótrofo en metionina. Esta enzima en T. cruzi está constituida por un dominio de tipo GAF fusionado a un dominio TIP41 (homólogo a TIP41 de levadura, represora de la vía TOR). Para evaluar la función del dominio GAF se trabajó con la cepa de S. cerevisiae carente de la actividad MSR y auxótrofa en Met, ob-servándose que tanto la proteína entera como el dominio GAF libre son activos in vivo. La posible actividad funcional del dominio TIP41 se evaluó utilizando una cepa Δtip41 de levadura. Mediante un ensayo de doble hibrido en levaduras, se determinó que tanto el dominio TIP41 como la proteína entera interactúan con TAP42 de T. cruzi. Para profundizar, se generaron líneas de epimastigotes sobreexpresantes de los dominios GAF y TIP41 de la fMSR y de la proteína TAP42. Se evaluó la tolerancia a benznidazol, nifurtimox, H2O2 y GSNO, me-diante titulación con Alamar Blue. Se vio que las líneas sobreexpresantes en el dominio GAF y en TAP42 presentaron mayor tolerancia al benznidazol, nifur-timox y H2O2, y son más sensibles al GSNO que la línea control. Mediante ensayos de western blot contra muestras de estos parásitos mostraron que las líneas sobreexpresantes en el dominio GAF y en TAP42 poseen un mayor nivel de la cPx y de la SOD A con respecto al control. Esto indica que la sobreexpre-sión de GAF y TAP42 modula de los niveles de otras proteínas antioxidantes. También se observó que la sobreexpresión de TAP42 y GAF induce a una ma-yor velocidad de diferenciación de epimastigote a trypomastigote metaciclico.