Caracterización funcional de una glutarredoxina monotiólica de Trypanosoma cruzi

SASONI N; MÁRQUEZ VE; IGLESIAS AA; GUERRERO SA; ARIAS DG

Santa Fe

Congreso; SAP XXVIII Reunión Anual; 2016

Las glutarredoxinas (Grx) son pequeñas proteínas vinculadas almetabolismo redox y a la homeostasis del hierro intracelular. Trypanosoma cruzies el parásito protozoario que causa la enfermedad de Chagas. En este trabajo,se presentan las propiedades funcionales y estructurales de una Grx monotiólicade T. cruzi. La proteína recombinante fue capaz de catalizar la reducción invitro de GSSG usando T(SH)2 como donante de electrones. Por otra parte, seobservó que la proteína recombinante fue capaz de coordinar clúster dehierro-azufre (ISC) mediante un ensayo de reconstitución in vitro. Losespectros de absorción resultantes revelaron dos picos característicos decomplejos de Grx-ISC. Además, el perfil obtenido mediante cromatografía defiltración por geles indicó que el complejo de Grx-ISC está formado por unaespecie dimérica de Grx. Por otra parte, se empleó un ensayo de complementaciónfuncional basado en el rescate de fenotipos de levaduras mutantes para Grxs.Los experimentos de complementación demostraron que el fenotipo de las mutantesde deleción en grx5 y grx4 pudieron ser rescatados por complementación con laGrx heteróloga, suprimiendo parcialmente la sensibilidad de las células aoxidantes exógenos. Estos resultados sugieren que la Grx en estudio puede tenerfunciones importantes en el metabolismo redox y en la biogénesis de ISC en T.cruzi.