EVIDENCIA DE UN SISTEMA TRXR/TRX EN Entamoeba histolytica

ARIAS, DIEGO; GUTIÉRREZ, CESAR; GUERRERO, SERGIO A.; IGLESIAS, ALBERTO A.

Huerta Grande – Córdoba – Argentina

Congreso; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2006

Sociedad Argentina de Protozoología

Entamoeba histolytica, un protozoo parasítico intestinal, es el agente causal de la amebiasis. En el hombre, el parásito usualmente vive y se multiplica a nivel intestinal, un ambiente con reducida presión de oxígeno. Durante la fase extraintestinal, E. histolytica es expuesto a elevadas concentraciones de oxígeno y consecuentemente de especies reactivas del oxígeno (ROS), altamente tóxicas para el parásito. La vía metabólica de detoxificación en este organismo ha sido poco caracterizada. Se ha propuesto a la cisteína como el principal tiol y uno de los compuestos responsables del mantenimiento del balance redox intracelular. En este trabajo presentamos el clonado, a partir de ADN genómico, de los genes ehtrxr y ehtrx41 codificantes para tiorredoxina reductasa y tiorredoxina, respectivamente. El sistema Escherichia coli BL21(DE3)/pRSETA fue utilizado para la expresión de las proteínas recombinantes. La EhTRXR fue evaluada en su capacidad de catalizar la reducción dependiente de NADPH (Km = 4,5 μM) del ácido 5,5´-ditiobis-(2-nitrobenzoico) (DTNB) (Km = 1,7 mM), EhTRX41 (Km = 3,6 μM) y E. coli TRX (Km = 4,6 μM). Este trabajo evidencia la presencia en E. histolytica de una nueva vía metabólica, el sistema EhTRXR/EhTRX41, que podría operar en la reducción de peróxidos dependiente del NADPH. En adición, se observa que EcTRX puede reemplazar EhTRX41 en este sistema antioxidante y podría ser de utilidad para el parásito en situaciones de estrés oxidativo. Estos resultados constituyen un aporte al proyecto genoma de este parásito, específicamente a la correcta asignación estructura-función, y sugieren además la necesidad de reconsiderar los mecanismos operativos en E. histolytica en situaciones de estrés oxidativo. Trabajo subsidiado por: CAI+D 2006, UNL; PAV´03 137 y PICT´03 01-14733, ANPCyT.