Estudio de las características funcionales de una glutarredoxina ditiólica en Trypanosoma cruzi

VANINA E. MÁRQUEZ; DIEGO G. ARIAS; MARIA L. CHIRIBAO; PAULA FARAL-TELLO; CARLOS ROBELLO; ALBERTO A. IGLESIAS; SERGIO A. GUERRERO

Congreso; SAP XXVI Reunión anual.; 2013

Muchos de los sistemas abocados a mantener el balance redox en Trypanosoma cruzi han sido vastamente estudiados. Algunos de los actores involucrados en estas vías, podrían ser además mediadores en procesos metabólicos, transcripcionales y de señalización. Tal es el caso de las glutarredoxinas, caracterizadas en organismos como bacterias, plantas y mamíferos, y cuyas funciones han sido demostradas tanto en la homeostasis de tioles como también en regulación de actividades enzimáticas y de factores de transcripción, a través de mecanismos de glutationilación/ deglutationilación. En este trabajo, presentamos los estudios de caracterización bioquímica y funcional de una glutarredoxina ditiolica de T. cruzi (TcrGrx). La caracterización bioquímica fue llevada a cabo tanto en sistemas enzimáticos para glutarredoxinas clásicas, como también en sistemas redox específicos de trypanosomátidos. Evidenciamos que TcrGrx cataliza la reducción de glutatión oxidado y compuestos glutationilados a expensas de tripanotión. Fueron evaluados cultivos de T. cruzi transformados con los vectores pTEX y pTEXTcrGrx,en los que se comprobó que la expresión de TcrGrx confiere a los parásitos resistencia frente a la acción de agentes oxidantes generados in situ. Se estudió la cinética de infección y la replicación de los amastigotes en células infectadas con T. cruzi sobreexpresando TcrGrx. Evaluamos el fenómeno de apoptosis (previamente descripto en T. cruzi) en epimastigotes de T. cruzi tranformados con pTEX-TcrGrx que podrían estar relacionando la funcionalidad de Grx a este tipo de muerte celular. Los resultados de los ensayos cinéticos in vitro y de los ensayos in vivo nos permiten postular que el rol de TcrGrx podría estar vinculado a la recuperación del pool de GSH y a funciones de regulación y protección a través de la (de)glutationalización de proteínas.