Estudios funcionales de los dominios GAF y TIP41 de la enzima free metionina sulfóxido reductasa de Trypanosoma cruzi

GONZALEZ, LN; GUERRERO, SA; IGLESIAS, AA; ARIAS, DG

Buenos Aires

Congreso; SAP XXXIII Reunión Anual; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

La metionina es un aminoácido susceptible a oxidarse a metionina sulfóxido(MetSO). La reducción de MetSO a metionina está catalizada por la enzimametionina sulfóxido reductasa. Trypanosoma cruzi, el agente etiológicode la enfermedad de Chagas, es auxótrofo en metionina. A través de un análisisde su genoma, identificamos una secuencia codificante para la metioninasulfóxido reductasa libre (fMSR). En T.cruzi, esta proteína está constituida por un dominio de tipo GAF fusionadoal dominio TIP41. Se obtuvieron células de epimastigotes de T. cruzi sobreexpresantes de estosdominios y se caracterizaron fenotípicamente.Los resultados obtenidos mostraron que la línea celular sobreexpresante deldominio GAF presenta mayor tolerancia al benznidazol, nifurtimox, H2O2y MetSO que la línea control (no sobreexpresante). La línea de parásitosrecombinantes sobreexpresantes del dominio TIP41 mostro mayor tolerancia abenznidazol y H2O2 y una menor tolerancia a nifurtimox quela línea control. Además esta línea sobreexpresante no exhibió cambiossignificativos en la sensibilidad a MetSO con respecto a la línea control. Ambaslíneas celulares mostraron ser más sensibles a GSNO que la línea control. También,los resultados obtenidos de ensayos de westernblot contra muestras de estos parásitos recombinantes indicaron que lalínea sobreexpresante del dominio GAF posee un mayor nivel de la proteína cPxcon respecto al control. En la línea de TIP41 se observó una disminución delnivel de mPx, APx y SODB. En adición, observamos que la sobreexpresión deldominio GAF induce una mayor tasa de diferenciación de epimastigote atrypomastigote metaciclico. Por el contrario, la sobreexpresión del dominioTIP41 reprime el proceso de diferenciación del parásito. Los resultados aquípresentados indican que los dominios de la fMSRposeen capacidad de modular de los niveles de otras proteínas antioxidantes,como así también procesos celulares del parásito. Financiado por ANPCyT(PICT2017-2268).