INVESTIGADORES
ARIAS Diego Gustavo
congresos y reuniones científicas
Título:
Rol de la glutarredoxina ditiólica en respuesta a las condiciones de estrés oxidativo en Trypanosoma cruzi.
Autor/es:
MÁRQUEZ, VANINA E.; ARIAS, DIEGO G.; IGLESIAS, ALBERTO A.; GUERRERO, SERGIO A.
Reunión:
Encuentro; SAP XXIV Reunión Anual.; 2010
Resumen:
Las glutarredoxinas (Grx) son oxidorreductasas ubicuas pertenecientes a la familia de las tiorredoxinas, que han sido identificadas en distintos organismos incluyendo bacterias, hongos, protozoos, plantas y mamíferos. En general las Grx estudiadas son capaces de reducir disulfuros mixtos entre el glutatión y otros tioles de bajo peso molecular o con residuos de cisteínas en proteínas. Solo algunas Grx pueden reducir puentes disulfuros intramoleculares. Sus funciones varían de acuerdo a características propias y de las células en las que se encuentren, pudiendo cumplir funciones en la protección frente al estrés oxidativo, en la regulación y señalización redox, entre otras. Previamente informamos la existencia de una glutarredoxina ditiólica en Trypanosoma cruzi (TcGrx). La caracterización bioquímica de la TcGrx recombinante se realizó no sólo en sistemas enzimáticos considerados estándar para distintas glutarredoxinas, sino también en sistemas enzimáticos específicos involucrados en el metabolismo redox de T. cruzi. Se pudo establecer que TcGrx es capaz de catalizar la reducción de disulfuros mixtos con mayor eficiencia que los disulfuros intramoleculares, indicando que sería funcional en aquellos procesos que implican glutationalización o deglutationalización de tioles y proteínas. Se realizaron cultivos de líneas de T. cruzi transformadas con los vectores pTEX y pTEX-TcGrx, a los que se sometió a estrés oxidativo y se comprobó mediante evaluación de la viabilidad de los parásitos en cultivos axénicos que la sobre expresión de TcGrx confiere resistencia en T. cruzi a la acción de los agentes oxidantes generados. A la luz de los resultados de los ensayos cinéticos in vitro, empleando la enzima recombinante, podría postularse que el rol de TcGrx estaría vinculado a lafunción protectiva de la glutationalización de proteínas, y la recuperación del pool de GSH a partir de GSSG, más que a la detoxificación directa de las especies reactivas del oxígeno. Mediante ensayos de inmunolocalización se pudo establecer la expresión de TcGrx tanto en epimastigotes como en trypomastigotes metacíclicos, localizada en vesículas citoplasmáticas, pero que en condiciones que implican estrés metabólico, podrían también ocurrir en el núcleo. Trabajo realizado con fondos del proyecto PICT 2007 668.