Aplicación diagnóstica: Antígenos extracelulares asociados al sistema de secreción VirB de Brucella abortus

M. VICTORIA DELPINO; CARLOS A. FOSSATI; PABLO C. BALDI

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas.; 2004

Abstract En el diagnóstico de la brucelosis humana y animal se han usado antígenos citoplasmáticos y de membrana, pero no se han evaluado antígenos secretados, los que han demostrado valor diagnóstico en otras infecciones (M tuberculosis, H pylori). Esto se debe a que no se han descripto proteínas secretadas por Brucella, aunque la bacteria posee un sistema de secreción tipo IV, codificado por el operón virB e involucrado en la supervivencia intracelular del patógeno. Hemos identificado en el sobrenadante de cultivo de Brucella abortus 2308 (wild type) 10 proteínas que estan ausentes en una mutante isogénica para el aparato de secreción VirB. Dos de estas proteínas, coloil glicina hidrolasa (CGH) y peptidil prolil cis trans isomerasa (homóloga a SurA de E. coli), se obtuvieron en forma recombinante y se analizó su utilidad diagnóstica por ELISA indirecto, usando sueros de caninos y humanos con brucelosis. Se usaron sueros de individuos no infectados para calcular el valor de Cut off ( densidad óptica -DO-media 2SD). La distribución de DO contra SurA fue similar en personas infectadas y normales, y lo mismo ocurrió con CGH. Ninguno de los sueros de pacientes brucelosos (N=62) fue positivo contra SurA, debido al elevado Cut off (1,038) y a la baja reactividad media de los infectados (0,560). Un resultado similar se obtuvo cuando se analizó la reactividad anti CGH (cut off= 1,148; reactividad media de los infectados = 0,372), siendo positivos solo 2 de los sueros analizados. En caninos, aunque el cut off para CGh fue menor que en humanos (0,591), sólo dieron resultado positivo 47 de 144 sueros (32,6%). En cuanto a SurA, el cut off fue de 0,925 y fueron positivos 34 de 144 sueros (23,6%). Los resultados indican que los ELISAs basados en CGH y SurA tienen baja sensibilidad y especificidad para el diagnóstico de la brucelosis humana y canina. La alta reactividad de los sueros normales contra estas proteínas podría deberse a la presencia de homólogos en otras bacterias comunes en el hombre y el perro.