Caracterización de una proteína BLUF de Acinetobacter sp. Ver3 de Laguna Verde.

JAIME, P.C.; VALLE L.; ALBARRACÍN V. H.; FARIAS M.E.; BORSARELLI C.D.; ABATEDAGA, I,

SAN MIGUEL DE TUCUMAN

Congreso; III Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos. GRAFOB DEL BICENTENARIO.; 2016

El fotorreceptor putativo BLUF-Ver3 proviene del genoma de Acinetobacter sp.Ver3, unmicroorganismo aislado de aguas superficiales de Lagunas de Altura de la Puna Andina(LAPAs), a 4400 msnm, y conservado en el Laboratorio de Investigaciones Microbiológicasde Lagunas Andinas, LIMLA (PROIMI-CONICET) de Tucumán. El estudio de estas cepascomenzó por la observación de la versatilidad y capacidad de crecimiento en altasconcentraciones de metales, antibióticos y sales, además de una intensa exposición a luzultravioleta (UV). Este fotorreceptor posee un dominio conocido como BLUF (Blue LightSensors Using Flavins) que contiene flavin adenin dinucleótido (FAD) como cofactor. Secaracterizan por absorber intensamente en la región espectral del UVA y azul (320?450 nm),y de ahí su importancia, debido a la relevancia ambiental y biológica de esta porción delespectro solar sobre la superficie terrestre.Los dominios BLUF son dominios modulares, pueden encontrarse como parte de unaarquitectura proteica compleja (asociadas a un dominio efector) o como dominios sensoressimples. Las proteínas cortas pueden estar relacionadas a interacciones proteína-proteína parala transducción de la señal lumínica.En el siguiente trabajo se clonó y produjo heterólogamente el fotorreceptor putativobacteriano BLUF-Ver3 (mediante el uso de técnicas de biología molecular y proteínasrecombinantes) al cual se le efectuaron medidas de espectroscopía de fluorescencia para unaprimera caracterización. Se analizó filogenéticamente y se comparó el contexto genético de lasecuencia BLUF-Ver3 con respecto al de otras especies del género Acinetobacter. Serealizaron pruebas de motilidad y formación de biofilm tanto en oscuridad como con luz azula 24°C y 37°C.Mediante el uso de vectores de clonación y expresión se consiguió una proteína del tamañoestudiado, que une el cofactor FAD y con características espectroscópicas pertenecientes aproteínas que unen flavinas. El análisis del contexto genético de BLUF-Ver3 mostró unaubicación diferente, con marcos de lectura colindantes distintos a los de los organismoscomparados, pudiendo este contexto estar relacionado con el resultado negativo de laspruebas de motilidad, permitiendo suponer un diferente tipo de respuesta fisiológica para estaespecie, mostrando la versatilidad de estos sensores modulares.