Nanopartículas de ZnO integradas en un inmunosensor para la detección temprana de galactomananos en muestras de suero humano

PIGUILLEM, SOFÍA V.; EVELIN MARIN BARROSO; JULIO RABA; MESSINA GERMÁN A.; BALDO, MARTÍN FERNÁNDEZ

La Pampa

Congreso; X Congreso Argentino de Química Analítica. 17 al 20 de Septiembre 2019. Santa Rosa, La Pampa ? Argentina; 2019

AAQA

Galactomanano (GMN) es un componente polisacárido de la pared celular de la especie Aspergillusque es liberado durante la invasión tisular. La aspergilosis invasiva (IA) es una infección humanacausada por un tipo de moho llamado Aspergillus fumigatus. Este moho a menudo se ha encontradoen hojas muertas, descomponiendo materia vegetal y fertilizante orgánico. La sintomatología deesta enfermedad puede ser inespecífica, puede causar tos, dolor pleurítico, fiebre y generalmentese presenta con derrame pleural. Cuando esta infección va al cerebro, puede causar convulsiones,accidentes cerebrovasculares, meningitis y puede ser fatal 1. GMN es un biomarcador de interésmédico porque se encuentra en la sangre de pacientes con IA. El propósito de este trabajo es eldesarrollo de un inmunosensor capaz de detectar GMN en etapas tempranas de esta enfermedad.Por lo tanto, las nanopartículas de ZnO (ZnONPs) se sintetizaron, caracterizaron y se utilizaroncomo plataforma de inmovilización de anticuerpos anti-GMN monoclonales en un inmunosensorfluorescente. La concentración de GMN capturada se detectó luego con fluorescencia inducida porláser (LIF) utilizando un sistema de anticuerpo anti-GMN conjugado con HRP. El HRP catalizó laoxidación de 10-acetil-3,7-dihidrofenoxacina no fluorescente (ADHP) a una resorufina altamentefluorescente, que se midió mediante un detector LIF, utilizando la excitación lambda a 561nm y laemisión a 585nm, en presencia de agua oxigenada. Los límites de detección (LOD) calculados parala detección de LIF y para un kit de prueba de ensayo inmunoabsorbente comercial (ELISA)comercial fueron 0.07 y 1 ng mL-1, respectivamente. Los coeficientes de variación dentro y entreensayo para el procedimiento de detección de LIF fueron inferiores al 6,3%. Este inmunosensor sepuede aplicar al diagnóstico temprano de IA, ya que ofrece varias ventajas atractivas como altaselectividad y sensibilidad debido a la inmovilización de anticuerpos monoclonales en ZnONPsutilizado como nano-plataforma de bioafinidad 2