INVESTIGADORES
MESSINA German Alejandro
congresos y reuniones científicas
Título:
Determinación de la actividad de β-glucosidase en suelo mediante electroforesis capilar con utilizando detección por fluorescencia inducida por laser
Autor/es:
PATRICIA W. STEGE; GERMÁN A. MESSINA; LORENA L SOMBRA; GUILLERMO BIANCHI; ROBERTO A. OLSINA
Lugar:
Bahía Blanca, Argentina.
Reunión:
Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009
Resumen:
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Los
microorganismos y enzimas del suelo son los principales mediadores de los
procesos que se llevan a cabo en el suelo, incluyendo la degradación de la
materia orgánica, mineralización de los compuestos y ciclo de los diferentes
nutrientes. Estos juegan un rol primordial en mantener la calidad del ecosistema
del suelo y la diversidad funcional [1]. La actividad enzimática es capaz de
proveer información sobre los cambios cuantitativos de la materia orgánica
presente en los suelos.
La β-Glu es una enzima
producida por las células bacterianas y fúngicas para satisfacer sus
necesidades de glucosa. La actividad de esta enzima es especialmente sensible a
cambios en el suelo y ha sido propuesta como un indicador temprano de la
calidad de los mismos, teniendo una estrecha relación con los cambios sufridos
por la materia orgánica de los suelos [2].
En este estudio proponemos un método simple y sensible
para la determinación de la actividad de β-Glu en
muestras de suelo utilizando electroforesis capilar con fluorescencia inducida
por láser como sistema de detección. Las muestras fueron obtenidas de
diferentes suelos destinados a la actividad agropecuaria de la provincia de San
Luis. Como sustrato para la enzima se utilizó fluoresceina mono-β-D-glucopyranosido
(FMGlc). La fluoresceína liberada fue cuantificada, obteniéndose un LOD y un LOQ de 1.3 10-7 y 6.4
10-6 mg mL-1, respectivamente. El tampón de corrida (BGE)
utilizado fue fosfato 40 mM,
pH 6.
Esta metodología demostró tener un menor límite de
detección que el método espectrofotométrico clásico, también nos permitió
trabajar con mezclas enzimáticas más pequeñas (0,1 g de suelo) lo cual
disminuyó notablemente la generación de desechos respecto a los producidos con
el método clásico.