Desarrollo de una columna de inmunoafinidad acoplada a un sistema de flujo continuo, para la cuantificación de anticuerpos IgG específicos para Helicobacter pylori en suero humano.

GERMÁN ALEJANDRO MESSINA; PATRICIA WANDA STEGE; LORENA L. SOMBRA; IRMA ESTER DE VITO; MARIA F. SILVA; LUIS DANTE MARTINEZ

Buenos Aires, Argentina.

Congreso; II Congreso Iberoamericano y IV Argentino de Química Analítica; 2007

  Helicobacter pylori es un bacilo Gram negativo que coloniza la mucosa gástrica humana y es el agente causal de gastritis crónica, úlcera péptica y cáncer gástrico [1, 2]. Los anticuerpos circulantes contra H. pylori son importantes para el diagnostico y el seguimiento del tratamiento antimicrobiano [3]. Los anticuerpos presentes en el suero  reaccionan con antígenos purificados de H pylori inmovilizados en una columna de teflón de 3 cm. de longitud con un id de 0,8 cm., rellena con vidrio de porosidad controlado modificado con grupos amino propil. Los anticuerpos unidos son cuantificados por un segundo anticuerpo anti cadena γ conjugado con la enzima fosfatasa alcalina (AP). Esta enzima hidroliza la unión fosfato monoester de p-nitrofenil fosfato, liberando p-nitrofenol (pNP) [4], el cual fue cuantificado espectrofotometricamente a 410 nm utilizando una celda de flujo de 100 uL La absorbancia del pNP es proporcional a la actividad de AP y consecuentemente a la cantidad de anticuerpos específicos para H. pylori presentes en cada muestra. El tiempo total de análisis no excedió los 30 min. En la práctica, la columna desarrollada permitió la determinación rápida, sensible y selectiva de anticuerpos para H. pylori cuando fue incorporada en un sistema FIA