PERSONAL DE APOYO
PORTO Ayelen Patricia
congresos y reuniones científicas
Título:
- Localización genética y caracterización bioquímica de OXA-101
Autor/es:
PORTO A.; GUTKIND G.; DI CONZA J.
Lugar:
Rosario, Santa Fe, Argentina
Reunión:
Jornada; XIII Jornadas Argentinas de Microbiología. AAM; 2008
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
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OXA-101 es una
b-lactamasa clase D derivada de OXA-10. Se ha descrito que las
enzimas derivadas de OXA-10 son oxacilinasas con espectro de hidrólisis
extendido a ceftacidima, cefotaxima, cefepime, cefpirome, aztreonam y
moxalactam. Estas enzimas han sido ampliamente descriptas en bacilos Gram
negativos no fermentadores, principalmente en Acinetobacter baumanii y P.
aeruginosa y son las b-lactamasas más frecuentemente encontradas en integrones clase 1.
OXA-101 ha
sido detectada en 3 especies de enterobacterias distintas, formando parte de la
región variable de un integrón clase 1 como gen en casete. Para analizar la
localización genética de blaOXA-101
y su transferibilidad se realizó un ensayo de conjugación en medio sólido,
utilizando como célula F+ a uno de los aislamientos clínicos que
presenta esta β-lactamasa, Enterobacter cloacae 153 -ECL153- (StrS,
AmpR), y como F- a Escherichia
coli HB101 (StrR, AmpS). Los transconjugantes fueron
seleccionados en medio sólido suplementado con Str (100 µg/ml) y Amp (30 µg/ml).
Se realizó PCR a las células seleccionadas de este ensayo para los genes intI1 y blaOXA-101, y se verificó la presencia de los mismos. Si
bien ECL 153 posee el gen blaTEM no se obtuvo el
amplicón correspondiente en las transconjugantes. Se determinó la CIM de antibióticos β-lactámicos
(ampicilina, piperacilina, cefalotina, cefoxitina, ceftazidima, cefotaxima,
cefepime e imipenem) al microorganismo dador, receptor y células
transconjugantes obtenidas. Sólo un aumento de los niveles de resistencia a
ampicilina y piperacilina fue observado en las transconjugantes respecto de
HB101. Además, se realizaron extractos crudos en los que luego se verificó la
hidrólisis de ampicilina (500 µg/ml) tanto en ECL 153 como en transconjugantes mediante
método iodométrico. Al realizar isoelectroenfoque al extracto crudo de ECL 153
se observó la presencia de tres enzimas,
una con un punto isoeléctrico de
5,4 (correspondiente a TEM), otra con pI 8 (compatible con AmpC) y con pI 7,2
(posiblemente OXA-101). De los experimentos realizados puede concluirse: a) El
integrón clase 1 que contiene el gen blaOXA-101
se encuentra localizado en un plásmido conjugativo. b) Los niveles de
resistencia a β-lactámicos observados en las transconjugantes podrían deberse a
un entorno genético no favorable para la expresión de esta enzima.