EFECTO DE PARTICULAS DE AIRE URBANO DE LA CIUDAD DE BUENOS AIRES SOBRE UN MODELO IN VITRO DE EPITELIO ASMÁTICO: estrés oxidativo y acción del Budesonide

DUGOUR A1, ASTORT F2., TASAT DR2, FIGUEROA. J1.

Mar del Plata

Congreso; 7º Congreso Argentino de Neumonología Pediátrica; 2015

Neumonología Pediátrica

Introducción: la contaminación del aire por partículas respirables (≥2.5 µ) se relaciona con mayor frecuencia de exacerbaciones y peor evolución en niños asmáticos; lo que estaría ocasionado por la inducción de estrés oxidativo. Los trabajos clínicos son contradictorios en cuanto a la acción de los corticoides inhalados sobre esta situación.Las Partículas del Aire de Buenos Aires (PABA) han sido caracterizadas y se ha mostrado que su inhalación produce estrés oxidativo e inflamación pulmonar en ratones. Objetivo: evaluar, en un modelo de epitelio asmático in vitro (células CALU-3 inflamadas con IL-1ß y H2O2), el efecto de la adición de PABA en: 1) la inflamación (liberación de IL-8 y activación de vía NFкB); 2) la respuesta al tratamiento con Budesonide (BUD); y 3) la participación del estrés oxidativo en este modelo.Material y Métodos: se recolectaron PABA con una bomba de muestreo en una zona céntrica de BA. Se cultivaron células CALU-3 en monocapa y se dividieron en: 1) grupo ?control? (medio de cultivo solo); 2) modelo ?Asma? (medio con IL-1β + H2O2; 3) modelo ?Asma + partículas? (IL-1β + H2O2 + PABA). Luego de 4 hs el medio fue reemplazado por medio fresco solo (control) o con BUD (células tratadas). Para estimar la participación del estrés oxidativo se tomaron otros 3 grupos de células en los que se repitió lo descripto agregando N-Acetyl Cisteína (NAC=antioxidante) al estimular cada grupo. Luego de 24 hs se evaluaron: viabilidad celular (técnica MTT), IL-8 en el sobrenadante (ELISA), y activación de NFкB en las células (inmunohistoquimica).Resultados: El agregado de PABA al epitelio ya inflamado produjo un aumento de la IL-8 y de la activación de la vía NFкB. El tratamiento con BUD disminuyó la liberación de IL 8 en ambos grupos (?asma? y ?asma + partículas?) pero en el último los niveles de IL-8 permanecieron más elevados. La adición de NAC previno todas las modificaciones inducidas por las PABA.Conclusiones: las PABA generan aumento de la inflamación en cel. CALU-3 ya inflamadas; este efecto, desencadenado la aparición de estrés oxidativo, no responde al tratamiento con BUD. El presente modelo podría ser útil en la evaluación inicial de estrategias terapéuticas destinadas al tratamiento de los niños asmáticos expuestos a PABA.