Particulas Aereas Urbanas de Buenos Aires Inducen Estrés Oxidativo, inflamación y apoptosis en células epiteliales pulmonares

ASTORT F., ORONA N., FERRARO S., MAGLIONE G., TASAT D.R.

Neuquen

Congreso; V CONGRESO ARGENTINO. Sociedad de Toxicología y Química Ambiental. Producción Sustentable y Compromiso Social para el Cuidado del Ambiente.; 2014

SETAC

Introducción: El material particulado (MP) es uno de los mayors contaminantes del aire en los grandes centros urbanos. Estudios epidemiológicos han demostrado que el MP es capaz de incrementar la morbilidad respiratoria y la mortalidad cardiovascular. La ciudad de Buenos Aires, al igual que el DF-Mexico, Sao Paulo-Brasil y Santiago de Chile-Chile, son definidas por la OMS como las megaciudades de Latinoamérica. Estas grandes áreas metropolitanas son afectadas por temperaturas extremas y la ocurrencia de islas de calor lo que ha generado un nuevo escenario donde la dinámica del MP y su impacto sobre la salud se ven agravados. La composición morfoquímica y los efectos sobre el pulmón de las partículas aéreas urbanas de Buenos Aires (UAP-BA) han sido previamente estudiadas por nuestro grupo, concluyendo que los HAPs y PCBs podrían ser responsables de su toxicidad. Sin embargo, el mecanismo celular por el cual ejercen su acción no ha sido estudiado. El objetivo de este trabajo fue estudiar la vía de transducción de señales asociada al efecto biológico de UAP-BA colectado en verano en la línea celular epitelial humana A549. M&M: UAP-BA fue recolectado usando un equipo de muestreo Mini Vol con un impactador de 2.5 µm de corte con un flujo de 1,8 L/min durante los meses de verano. Las células A549 fueron cultivadas por 24 hs y luego expuestas a diferentes concentraciones de UAP-BA (10-100-200 µg/ml) a distintos tiempos (2-4-8-12 y 24 hs). La citoquina IL-8 se evaluó mediante ELISA. La apoptosis fue analizada por tinción nuclear con Hoechst. Las especies reactivas del oxigeno (ROS) fueron analizadas empleando la sonda DHR123, los niveles de GSH empleando el reactivo DTNB. NfkappaB y MUC5AC fueron evaluados por inmunocitoquímica. Resultados: La exposición de células A549 a UAP-BA provocó un aumento en ROS en forma dosis y tiempo dependiente. Este resultado es consistente con la disminución en los niveles de GSH. Se observó un aumento en los niveles de IL-8 a partir de las 2 hs con las concentraciones 100 y 200 µg/ml. El porcentaje de células apoptóticas aumento 2 veces con respect al control a las 4 hs con las concentraciones 100 y 200 µg/ml. Se observó aumento en su expresión y localización nuclear del factor NFkappaB y aumento en la exporesion de MUC5AC. Conclusión: Estos datos sugieren que la exposición a UAP-BA de células epiteliales pulmonares humanas provoca inflamación y muerte celular por un mecanismo que involucraría al estrés oxidativo, la activación del factor NFkappaB y la liberación de Mucinas.