INVESTIGADORES
TORRES TEJERIZO Gonzalo Arturo
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudios de movilización del plásmido críptico pLPU88b de Sinorhizobium meliloti en el ambiente suelo, en condiciones de campo y en microcosmos
Autor/es:
GIUSTI, M. A.; LOZANO M.J.; TORRES TEJERIZO GA; MARTINI MC; SALAS, E.; PISTORIO, M.; DEL PAPA M. F; ETCHEGARAY R; MORETTI E; LAGARES A.
Lugar:
Piriapolis, Maldonado
Reunión:
Congreso; XXV Reunión Latinoamericana de Rizobiología la XXV y I Congreso Nacional de Microorganismos Promotores del Crecimiento Vegetal (I MIPCV); 2011
Institución organizadora:
RELAR
Resumen:
Mediante el uso de inoculantes de rizobios se introducen a
los suelos de cultivo bacterias seleccionadas en base a sus capacidades
destacadas de competición para la nodulación y fijación de nitrógeno. En ese
marco, sin embargo, poco se ha investigado respecto del impacto de la
inoculación en lo que hace a la dispersión de genes desde la cepa introducida a
la comunidad de rizobios y a otras bacterias presentes en el suelo. Teniendo en
cuenta que muchos rizobios son portadores de plásmidos y/o de islas simbióticas
transmisibles, es importante conocer la frecuencia con que tienen lugar eventos
de transferencia horizontal de genes desde rizobios inoculados en semillas
hacia rizobios alóctonos del suelo con el objetivo de estimar el impacto de las
cepas introducidas sobre el germoplasma de los rizobios (y de otras bacterias)
presentes en el suelo inoculado.En este trabajo exploramos eventos de
transferencia plasmídica a partir de la liberación de la cepa de Sinorhizobium
meliloti LPU88AII (Smr, Spr, Gmr, todas resistencias espontáneas) portadora de
un plásmido movilizable (pLPU88b). La misma fue inoculada sobre semillas de
alfalfa siguiendo las prácticas regulares utilizadas a campo. Mediante un
ensayo de PCR investigamos la presencia del plásmido pLPU88b en los rizobios
alóctonos que nodularon dichas plantas, y en aquellos que nodularon plantas
trampa sembradas a largo del primer año y medio post-siembra. En esas
condiciones de ensayo y luego del análisis de más de 1400 nódulos, la
inoculación de la cepa de S. meliloti no resultó en la recuperación de rizobios
transconjugantes noduladores de alfalfa portadores del plásmido pLPU88b.La transferencia
del plásmido pLPU88b, fue también evaluada en un ensayo de microcosmos en el
que además de una cepa inoculante dadora, esta vez S. meliloti LPU88
(pSmeLPU88b::Tn5, Nmr), se introdujo como receptora la cepa Agrobacterium
tumefaciens UBA PF2. La búsqueda de transconjugantes que pudieron formarse en
la masa del suelo y en la rizósfera durante el ensayo de microcosmos fue
realizada a lo largo de 35 días luego de la inoculación, encontrándose valores
de transferencia menores a 8,7 x 10-5 e iguales a 6,8 x 10-7
transconjugantes/célula dadora en la masa suelo y en la muestra rizosférica
respectivamente. Teniendo en cuenta que el número de rizobios en suelos
naturales de cultivo oscila generalmente entre 10-105/g de suelo (mucho menor
que el número presente en nuestros ensayos de microcosmos), puede inferirse que
la transferencia conjugativa en suelo de plásmidos como el estudiado en este
trabajo, es un evento de baja frecuencia y significativo sólo en el contexto de
la evolución genética de la población a largo plazo