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La fosfatasa alcalina intestinal (FAi) no tiene aún un rol definido. Se estudió su interacción con el calcio (Ca) y el efecto de dicha interacción sobre la absorción de Ca. Con FAi purificada a par-tir del duodeno de ratas adultas se halló que el Ca se une a la FAi siguiendo un modelo de ?n? sitios independientes e igual afinidad. El efecto del Ca sobre la actividad de FAi se investigó espectrofotométricamente y mostró un efecto bifásico dependiendo de la concentración de Ca. A concentraciones de Ca menores a 10 mM la actividad se incrementó linealmente, mientras que con concentraciones de Ca mayores a 20 mM la relación fue inversa [r=0,946; r=-0,703]. También se hallaron cambios estructurales de la FAi producidos por incubación con Ca 50 mM por cromatografía de exclusión molecular y Western blot. Se detectaron dos fracciones 168±6 kDa (con actividad) y 425±45 kDa (sin actividad). El punto isoeléctrico de la enzima resultó más alto en presencia de Ca (0 mM=4,35±0,02; 50 mM=4,85±0,06), siendo igual para las dos fracciones mencionadas. El tratamiento con EGTA después de la adición de Ca no restauró la actividad enzimática, pero produjo desagregación de la enzima y aparición de sus monómeros, indicando que el Ca podría ser requerido para la actividad de la FAi o estar involucrado en la estabilidad de la estructura dimérica. Empleando intestino aislado in situ se determinó el efecto de diferentes concentraciones de Ca in vivo hallándose que la actividad enzimática fue mayor a medida que se incrementó la concentración de Ca. La FAi hidroliza éster monofosfóricos generando fosfato y protones y existe evidencia de que la disminución del pH luminal modificaría la actividad de los canales de Ca TRPV6. Por ello se realizaron experimentos de sacos duodenales evertidos con diferentes concentraciones de Ca luminal (1, 10, 50 y 100 mM). Se observó un descenso significativo del pH en solución mucosa de los grupos con Ca 10, 50 y 100 mM. La fracción de absorción disminuyó a medida que se incrementó la concentración de Ca, paralelamente al descenso de pH. Cuando estos experimentos fueron llevados a cabo en presencia de L-fenilalanina (inhibidor de la FAi) se observó un descenso de pH significativamente menor con incremento en la frac-ción de absorción en todos los grupos. Estos resultados fortalecerían la hipótesis de que el pH regularía la entrada de Ca y la FAi sería sensora de las concentraciones de Ca luminal e impediría el ingreso de cantidades tóxicas del catión al enterocito.

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