Determinación de apoptosis en folículos bovinos con enfermedad quística ovárica

STANGAFERRO ML, PALOMAR MM, SALVETTI NR, ORTEGA HH, REY F

Universidad Complutense de Madrid. Madrid, España

Congreso; VII Congreso de Ciencias Veterinarias y Biomédicas; 2008

INTRODUCCIÓN Los quistes ováricos son frecuentes durante el periodo posparto en el ganado bovino lechero y es una de las principales causas de falla reproductiva y pérdidas económicas, dado que esta condición prolongue el intervalo parto-primer celo (Vanholder et al., 2006).  Debido a que los folículos quísticos, a diferencia de los folículos atrésicos, no regresan, se especula que el crecimiento excesivo de estos puede ser debido al retraso o declive del control de la regresión, que es atribuible al desequilibrio de los procesos de proliferación y muerte celular (Stangaferro et al. 2007). El objetivo del presente estudio fue evaluar mediante inmunohistoquimica la expresión de bax, proteína proapoptótica,  en diferentes estructuras foliculares en ovarios normales y en aquellos con quistes inducidos experimentalmente mediante ACTH. MATERIAL Y MÉTODOS En esta experiencia se utilizaron 10 vaquillonas de la raza Holando Argentino puros por cruza, de entre 18 y 24 meses de edad, con un peso promedio de 400 kg. Todas las vaquillonas fueron sometidas a la sincronización de sus ciclos estrales mediante el protocolo Ovsynch. Los animales se dividieron en dos grupos de 5 animales cada uno, el numero 1 fue control y al numero 2 se le realizó la inducción experimental de quistes foliculares mediante la administración de ACTH sintética cada 12 horas por 7 días. El grupo 1 fue mantenido en condiciones normales sin tratamiento. Luego de la extracción de los ovarios se efectuaron cortes seriados de 4 µm de espesor sobre los que se realizó una técnica inmunohistoquímica indirecta para la determinación de bax. La reacción fue revelada utilizando 3,3´ diaminobencidina (Ortega et al., 2007). Se realizó la contracoloración hematoxilina. Se realizó análisis digital de imágenes. RESULTADOS En los foliculos terciarios del Grupo 1 se obtuvieron los siguientes resultados: Granulosa(G) 16.37+/-6.38,  Teca Interna(TI) 15.49+/-6.42, Teca Externa(TE) 3.2+/- 3.5. En foliculos terciarios del grupo 2 se encontró, G 20.32+/- 8.42, TI 24.48+/-11.06, TE 5.99+/- 3.95 y en las capas ovaricas de los quistes los resultados fueron G 11.93+/- 3.87, TI 15.81+/- 4.63, TE 8.22+/- 6.01. No hubo diferencias significativas entre los grupos analizados CONCLUSIONES En conclusión, el modelo utilizado probó ser una buena herramienta para el estudio de esta enfermedad en cuanto a aspectos celulares. Por otro lado hemos encontrado que la formación de los quistes foliculares está asociada a una escasa expresión de una proteína crucial en el ciclo de apoptosis como es bax.