Estudio de la emisión de 7,8-dihidropterinas en solución acuosa

MARIANA P. SERRANO, MARIANA VIGNONI, M. LAURA DÁNTOLA, CAROLINA LORENTE, ANDRÉS H. THOMAS

La Serena

Congreso; X Encuentro Latinoamericano de Fotoquímica y Fotobiología (X ELAFOT); 2010

Universidad de Santiago de Chile

Las dihidropterinas se encuentran en el organismo cumpliendo diferentes funciones. Los dos derivados más importantes de este grupo son 7,8-dihidroneopterina (H2Nep) y 7,8-dihidrobiopterina (H2Bip). H2Bip es un intermediario en la ruta de reciclado de la tetrahidrobiopterina, la cual actúa como donor de electrones en una serie de reacciones del metabolismo de los aminoácidos.[i] H2Nep, por su parte, es secretada junto con su análogo oxidado neopterina (Nep) por células del sistema inmune, particularmente por macrófagos activados.[ii] A diferencia de sus análogos oxidados, las dihidropterinas presentan débil emisión de fluorescencia y no generan oxígeno singlete.[iii] Se cree que este comportamiento se debe a una eficiente desactivación no radiativa del primer estado excitado singlete (S1). Sin embargo, la caracterización de los estados excitados de estos compuestos es muy compleja porque su inestabilidad. Se oxidan fácilmente[iv] y, por ende, las contaminaciones con derivados oxidados son inevitables. En esta contribución presentamos un estudio resuelto en el tiempo de la florescencia de H2Bip, H2Nep, 6-metil-7,8-dihidropterina y 6-hidroximetil-7,8-dihidropterina. Se prepararon soluciones acuosas (pH 5,5-7,0) y se analizaron cuantitativamente las impurezas de pterinas oxidadas por Cromatografía Líquida de Alto Rendimiento (HPLC Prominence de Shimadzu). La emisión de las soluciones se analizó en un fluorómetro Horiba Jobin-Yvon que utiliza la técnica Time-correlated Single Photon Counting (TCSPC). En todos los casos se observaron decaimientos de la emisión biexponenciales con un componente de tiempo de vida (tF) corto (< 1 ns), que fue asignado a la dihidropterina estudiada, y un componente de tF largo (> 5 ns), que fue asignado a la contaminación del análogo oxidado correspondiente. Mediante análisis global se obtuvieron los valores de tF y los espectros de emisión de las dihidropterinas. [i]     C. A. Nichol, G. K. Smith and D. S. Duch, Annu. Rev. Biochem., 1985, 54, 729. [ii] C. Huber, J. R. Batchelor, D. Fuchs, A. Hausen, A. Lang, D. Niederwieser, G. Reibnegger, P. Swetly, J. Troppmair and H. Wachter, J. Exp. Med., 1984, 160, 310. [iii]   M. L. Dántola, A. H. Thomas, A. M. Braun, E. Oliveros and C. Lorente, J. Phys. Chem. A, 2007, 111, 4280. [iv]   M. L. Dántola, M. Vignoni, A. L. Capparelli, C. Lorente and A. H. Thomas, Helv. Chim. Acta, 2008, 91, 411.