Salmonelas multiresistentes hipoinvasivas pero con elevada proliferación intracelular

DI CONZA J; AYALA J; MOLLERACH M; GUTKIND G

Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Latinoamericano de Microbiología. X Congreso Argentino de Microbiología; 2004

Asociación Argentina de Microbiología

Las salmonelas no tifoideas son patógenos intracelulares capaces de internalizarse y de proliferar dentro de compartimentos vacuolares de las células eucariotas no fagocíticas. En diferentes serovariedades, la existencia de plásmidos de virulencia (locus spv) incrementa la capacidad virulenta. Estos plásmidos, rara vez coexisten con plásmidos de resistencia, y poco se sabe del aporte de estos últimos a la virulencia de este género. Se investigó la presencia de plásmidos de virulencia en 25 aislamientos clínicos de Salmonella enterica, algunos provenientes de infecciones invasivas, con una llamativa resistencia plasmídica a -lactámicos y/o aminoglucósidos. Mediante PCR e hibridación ADN/ADN se investigó la presencia del gen spvC, y los replicones repB y repC, que caracterizan a los plásmidos de virulencia típicos de salmonela. Los mismos se hallaron en las serovariedades donde ya han sido descriptos: S. Enteritidis y Typhimurium. Ninguno de los aislamientos con plásmidos de resistencia (13/13 S. Infantis y 2/4 S. Typhimurium) mostró las características evaluadas. Para poder comparar el comportamiento de las cepas con plásmidos de (multi) resistencia versus las que presentan plásmidos de virulencia, se realizaron ensayos de infección en células eucariotas no fagocíticas. Las líneas celulares empleadas fueron HeLa (permisiva para la proliferación intracelular) y NRK (no permisiva). Como era de esperar, la cepa tipo con plásmido de virulencia (S. Typhimurium SL1344) y la isogénica curada de plásmido (SV4277) mostraron una capacidad de invasión notable en ambas líneas celulares, con el índice de proliferación esperado en HeLa (alrededor de 5) y casi nulo en NRK. Sin embargo, los aislamientos clínicos multirresistentes (S. Infantis S21 y S07) se comportaron como hipoinvasivos (hasta 5 veces menor) pero el índice de proliferación fue mucho mayor (en algunos casos superior a las 10 veces) y en ambas líneas celulares. Estas características parecen estar ligadas al plásmido de multirresistencia ya que estos resultados se observaron con la cepa transformante SV21 (SV4277 con plásmido de multirresistencia). Finalmente, para profundizar sobre el comportamiento de las salmonelas en estas líneas celulares se realizaron estudios mediante microscopía de inmunofluorescencia. A diferencia de SL1344 que no se observa proliferando en NRK y altera su morfología de bacilar a redondeada, S21 se encuentra proliferando activamente y mantiene su morfología bacilar.