Staphylococcus aureus con sensibilidad disminuida a vancomicina: Caracterización de dos aislamientos clínicos isogénicos.

DI GREGORIO S; CUIROLO A; GARDELLA N; PERAZZI B; FAMIGLIETTI A; MOLLERACH M

Montevideo, Uruguay

Congreso; XX Congreso Latinoamericano de Microbiología; 2010

Sociedad Uruguaya de Microbiología

En los últimos años, se ha documentado la emergencia de cepas de Staphylococcus aureus con sensibilidad disminuida a vancomicina (VISA) y cepas con resistencia heterogénea (hVISA).  En este trabaj o describimos la caracterización de dos aislamientos provenientes de un paciente con infección osteoarticular: uno previo y otro posterior al tratamiento con vancomicina (D1 y D2 respectivamente). Las pruebas de sensibilidad fueron realizadas según recomendaciones del CLSI. Ambos aislamientos resultaron resistentes a β-lactámicos, gentamicina, y rifampicina (difusión con discos) y sensibles a vancomicina (CIM por microdilución). Se realizó test de screening en agar BHI con 3 μg/ml y 6 μg/ml de vancomicina, observándose crecimiento de D2 en 3 μg/ml. Mediante PAP-AUC (área bajo la curva en el análisis poblacional) ambas cepas resultaron ser hVISA.  El mayor nivel de resistencia a vancomicina de D2 fue acompañado de una marcada disminución de la resistencia a oxacilina (CIM a oxacilina D1>128 μg/ml; D2=1 μg/ml). Mediante reacciones de PCR resultaron  mecA positivos, luk-PV negativos y agr tipo II. La funcionalidad del locus agr fue demostrada evaluando la actividad hemolítica de las cepas en agar sangre. La isogenicidad entre D1 y D2 fue demostrada por PFGE. Además fueron genotipificados por spa typing (t002) y MLST (ST100). El tipo de SCCmec no pudo ser caracterizado por mapeo con PCR utilizando las estrategias convencionales ya descritas. Se realizó microscopía electrónica de transmisión observándose un aumento en el grosor de la pared del aislamiento D2 con respecto a D1. Los resultados obtenidos son coincidentes con el fenotipo VISA y permiten suponer que el fracaso terapéutico estaría relacionado con la existencia de una población heterogénea compuesta por células sensibles y resistentes a vancomicina (hVISA). El test de screening con 3μg/ml de vancomicina fue útil para evidenciar este fenotipo, confirmado luego por el método de PAP-AUC. Los aislamientos presentan el mismo spa tipo, y pertenecen a un ST del mismo complejo clonal (CC5) que el del clon resistente a meticilina detectado como prevalente en infecciones adquiridas en la comunidad en Argentina. Esto debe considerarse como una alerta desde el punto de vista epidemiológico considerando la elevada epidemicidad y virulencia del mismo.