INVESTIGADORES
ROMERO Eder Lilia
congresos y reuniones científicas
Título:
NANOMEDICINAS ANTIPARASITARIAS: ACCIÓN ANTILEISHMÁNICA INMEDIATA PROMOVIDA POR LIPOSOMAS ULTRADEFORMABLES
Autor/es:
JORGE A. M. MONTANARI, CRISTINA MAIDANA, MÓNICA ESTEVA, MARÍA J. MORILLA, EDER L. ROMERO
Lugar:
La Rural
Reunión:
Jornada; JorFyBI; 2007
Resumen:
Introducción: Con el fin de evaluar el uso de matrices liposomales ultradeformables de 100nm de diámetro como agentes antiparasitarios para el tratamiento de la leishmaniasis cutánea humana, se ensayaron sobre cultivos celulares macrofágicos y epiteliales los efectos citotóxicos y de estrés oxidativo de los liposomas, así como su capacidad de captura e internalización por las células in vitro. Por otro lado, en promastigotes de Leishmania brasilensis, se evaluó el efecto de los liposomas ultradeformables sobre crecimiento, motilidad, y supervivencia de parásitos, así como se estudió la captura liposomal y su destino intraparasitario por microscopía confocal. Este trabajo se enmarca en el desarrollo de un tratamiento de aplicación tópica contra leishmaniasis cutánea basado en la combinación de un sistema de liberación controlada compuesto por liposomas ultradeformables como vehiculizadores de ftalocianinas fotoactivables, cuya obtención y caracterización se hallan ya publicadas Materiales y Métodos: Los liposomas ultradeformables se obtuvieron a partir de fosfatidilcolina de soja y colato de sodio. Sobre cultivos celulares de las líneas VERO y J774 se realizaron ensayos de citotoxicidad por MTT, y de estrés oxidativo depleción de glutationa. Las capturas de liposomas ultradeformables se realizaron incubando sobre los cultivos a distintos tiempos suspensiones liposomales con distintos marcadores fluorescentes en su espacio acuoso interno (HPTS), en zonas asociadas a membrana (ftalocianina de Zinc), y en fosfolípidos (Rhodamine-PE). Para el caso de los parásitos la fijación de las muestras se realizó por inmovilización con agarosa para preservar las estructuras celulares. Las fotografías se tomaron en un microscopio confocal de fluorescencia Olympus FV300 Resultados: Los liposomas no mostraron efecto citotóxico sobre cultivos de Vero y J774 hasta una concentración de 10 mM. En cambio, sobre leishmanias la incubación por tiempos desde 5 minutos en adelante mostraron inmovilidad de parásitos al microscopio, caída en el crecimiento respecto del control, y viabilidad por MTT reducida hasta en un 50%. La microscopía confocal reveló la captura de los liposomas por parte de los promastigotes de leishmania, verificandose la internalización de las marcas fluorescentes. Conclusiones: El efecto antileishmánico incluso a tiempos muy cortos de incubación resultó muy promisorio, y se pudo atribuir el mismo a la captura endocítica de los liposomas por parte de los promastigotes  (están programados a corto plazo ensayos comparativos de toxicidad a tiempos cortos entre estas matrices liposomales y una droga convencional antileishmánica de antimoniales pentavalentes, cuya actividad está descripta para tiempos sensiblemente mayores). Dado que la única región de la membrana plasmática de promastigotes capaz de realizar endocitosis es el bolsillo flagelar (de sólo 1 m2 de área), la captura de material particulado, que no había sido descripta antes, resulta de amplio y relevante interés.