Desarrollo de vacunas alternativas contra el virus del papiloma humano 16 (HPV16) mediante el uso de sistemas de expresión en plantas de tabaco.

ZELADA A., STEINBERG T., MORGENFELD, M., MÓDENA N., WIRTH S., SEGRETIN M.E., GISSMANN L., BRAVO-ALMONACID, F, Y MENTABERRY A.

Tucumán, Argentina

Jornada; Coloquio de Biotecnología y Química; 2004

Las infecciones por HPV son la principal causa del cáncer uterino en humanos y la principal enfermedad cancerosa en mujeres del Tercer Mundo. Se estima que medio millón de nuevos casos de cáncer cervical son causados por este virus cada año en el mundo entero, produciendo aproximadamente 40000 muertes anuales. Una vacuna efectiva contra la infección por HPV podría prevenir el desarrollo de la mayoría de las displasias cervicales y carcinomas humanos. Diferentes tipos de vacunas (profilácticas y terapéuticas) se encuentran actualmente en desarrollo siendo la gran mayoría subvencionadas por companías farmacéuticas. Las vacunas profilácticas se basan en la producción de pseudovirus de HPV. Estos pseudovirus son obtenidos por autoensamblaje de las proteínas HPV-L1y/o L2 las cuales son expresadas en bacterias, levaduras o en células de insectos. La inmunización de animales con VLPs provee un efectivo grado de protección contra el desafío con papiloma virus y ha demostrado ser un potente inmunógeno en humanos . Las vacunas terapéuticas, se basan en que la oncoproteína viral E7 es expresada constitutivamente dentro de las células tumorales convirtiéndola en blanco atractivo para inmunoterapia. Desafortunadamente esta proteína es un pobre inmunógeno y la mayoría de las estrategias actualmente se basan en la fusión de péptidos derivados de E7 a diferentes proteínas "carriers". El presente proyecto se propone desarrollar diferentes estrategias para expresar proteínas antigénicas de papiloma virus humano (HPV) en plantas transgénicas de tabaco. Como sistemas de expresión utilizaremos vectores virales como sistemas integrativos y expresión en cloroplastos. El sistema de expresión integrativo se basa en la utilización de un amplicón viral que consiste en una copia completa del genoma del virus X de la papa  (PVX) cuya expresión es dirigida por el promotor CAMVS35. Se expresarán dos antígenos de HPV: la proteína L1, proteína de cápside viral, y la proteína E7, proteína oncogénica. En el caso de L1 se construirán versiones que permitan acumular la proteína transgénica en citoplasma con la finalidad de obtener pseudovirus de HPV por autoensamblaje que serán utilizados para estrategias de vacunación. L7 será expresada como proteína citoplasmática para ser utilizada como fuente de antígeno para un sistema de diagnóstico o bien como proteína de fusión a la cápside viral de PVX produciendo viriones quiméricos los cuales serán utilizados para vacunación. Los amplicones utilizados serán delecionados para eliminar sus funciones de transporte célula a célula con el objeto de lograr un contenimiento biológico eficaz. En cloroplastos se expresarán dos versiones de la proteína E7 una soluble y otra fusionada a la cápside viral de PVX para obtener viriones quiméricos por autoensamblado.